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背景：直肠癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，目前位于腹膜反折以下的低位直肠癌手术方式根据肿瘤大小、临床分期、患者解剖特异性等因素，可以选择腹会阴联合切除术(Miles)、肿瘤局部切除术和低位前切除术(lowanterior resection，LAR)。为达到保肛目的而采取的低位前切除术存在吻合口复发率增高的风险，而某些早期病变行局部切除术亦存在肿瘤局部复发的风险。目前临床尚无降低上述风险的有效治疗方案。
目的：本课题拟建立进展期小鼠低位直肠癌局部切除术模型，术后辅以CIK细胞凝胶治疗，初步探讨低位直肠癌局部切除联合细胞免疫治疗预防肿瘤复发的效果，以期拓宽低位直肠癌保肛手术的适应证。
方法：1、评估低位直肠癌动物模型建立方法：40只BALB/c雄性小鼠分为五组(n=8)：葡聚糖硫酸钠组，3％(w/w)浓度的葡聚糖硫酸钠溶液饮用七天，诱导结肠炎后灌注Colon26结肠癌细胞致瘤；三硝基苯磺酸组，结直肠内灌注30 mg/mL50％(v/v)乙醇溶液，共两次，诱导结肠炎后灌注Colon26结肠癌细胞致瘤；低浓度酸碱组，直肠内依次灌注100μL0.1 mol/L的盐酸溶液与氢氧化钠溶液以破坏直肠粘膜，生理盐水反复冲洗后灌注Colon26结肠癌细胞致瘤；直肠粘膜磨损组，利用微型磨损器损伤直肠粘膜后灌注Colon26结肠癌细胞致瘤；直肠粘膜下注射组，用注射器将Colon26结肠癌细胞直接注射入小鼠直肠粘膜下致瘤。2、选取致瘤成功的小鼠，进行低位直肠肿瘤的局部切除手术，评估手术成功率。3、获取小鼠脾脏淋巴细胞，利用rm INF-γ、rm IL-2及小鼠CD3单抗将淋巴细胞诱导为CIK，与医用透明质酸钠凝胶等比例混合制备工程化CIK细胞凝胶；4、选取16只低位直肠癌致瘤满意的小鼠，行肿瘤局部切除后随机分为两组(n=8)：对照组不作进一步处理，实验组加用CIK凝胶治疗。术后十二天从大体及组织病理切片观察肿瘤复发及抑制情况。
结果：1.直肠粘膜下注射组致瘤率为87.5％，直肠粘膜磨损组致瘤率12.5％，其余各组未见致瘤。注射组与磨损组的肿瘤经组织病理切片观察证实为直肠肿瘤，且肿瘤生长部位一致。2.小鼠原位直肠癌局部切除术成功率100％，未见小鼠死亡、直肠瘘、感染等并发症。术后直肠癌复发率87.5％。3.手术加CIK凝胶治疗后，小鼠低位直肠癌复发率为12.5％，而单纯手术组复发率为62.5％。
结论：1.本课题通过评估不同的小鼠低位直肠癌模型建立方法，证实粘膜下注射法可以获得高致瘤率的小鼠低位直肠癌模型。低位直肠癌的肿瘤位置靠近小鼠肛门，方便直视下观察和手术操作。2.进展期小鼠低位直肠癌局部切除手术成功率高，没有动物死亡或术后并发症的发生。3.使用CIK凝胶治疗能降低进展期小鼠低位直肠癌局部切除术后的复发率。该方法具有潜在的临床应用前景，将有可能拓宽低位直肠癌保肛手术的适应证。