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目的:①通过不同的激素应用时间分别建立雌、雄大鼠的急性和慢性激素性股骨头坏死模型,以检验外源激素条件以及动物体内激素代谢拮抗作用对该模型的影响,为激素性股骨头坏死模型的标准化提供科学依据; ②通过对激素性股骨头坏死模型大鼠动物行为学的观察,探究股骨头坏死通过引起肾阳虚影响动物行为学指标的作用; ③应用急性早期激素性股骨头坏死模型分别评价侧耳子实体水提物和醇提物基于中医理论防治股骨头坏死的药效作用,为抗激素性股骨头坏死的特色中药新药的开发研究提供新的科研思路。 方法:①Wistar大鼠40只,雌雄各半,分为正常组(雌性、雄性)和模型组(雌性、雄性),每组10只,通过激素(甲基强的松龙)联合内毒素短期注射(3次、3天)和长期注射(12次、12周),分别建立模型大鼠的急性与慢性激素性股骨头坏死模型,以组织病理学实验进行比较分析和模型验证; ②应用动物行为学实验综合评价上述模型大鼠的一般行为学、抓力、自主活动、悬尾时间等指标,并与正常组大鼠进行比较; ③通过短期激素注射建立大鼠早期激素性股骨头坏死模型,分别用5g/kg生药剂量的侧耳水提物和醇提物灌胃给药,每天一次,以阿仑膦酸钠为阳性对照药,连续灌胃6周,每周观察大鼠一般体征,第6周进行动物行为学观察,而后用水合氯醛麻醉处死各组大鼠,取完整股骨头进行组织病理学观察(HE染色),综合比较各组间差异。 结果:①模型组大鼠一般行为学表现未见异常,组织病理学结果显示雌/雄大鼠在短期和长期激素应用后均表现为软骨表面台阶样改变、表面纤维结缔组织增生、软骨细胞排列紊乱、软骨细胞数减少、软骨基质不均匀、骨小梁稀疏变窄或断裂分解成云片状、骨细胞肿大、空骨陷窝增多、骨髓弥漫性坏死和溶解、骨髓大面积脂肪细胞化等病理改变,雌鼠和雄鼠病理学表现无显著差别,都能用激素联合内毒素构建股骨头坏死模型;短期和长期激素应用都能引起大鼠股骨头病理改变,其中长期模型的病理表现更显著,可见骨髓被大量脂肪细胞所取代; ②模型组大鼠造模7天后出现体重减轻的一般生理学改变,抓力、自主活动和悬尾时间等行为学指标均较正常组有显著下降(P<0.05、P<0.01),说明激素性股骨头坏死能对动物行为学指标产生影响; ③侧耳水提物能明显改善股骨头坏死模型大鼠的抓力、自主活动以及悬尾时间(P<0.05、P<0.01),能从组织病理方面改善软骨细胞排列情况、增加骨小梁区域面积、抑制骨小梁断裂、减少空骨陷窝、抑制骨髓脂肪细胞化,较模型组有明显改善,甚至接近正常组水平;侧耳醇提物对模型组动物行为学指标改善作用不明显,只对悬尾时间有作用,其组织病理学表现不如侧耳水提物,仍可见软骨表面台阶样改变、软骨细胞数减少、软骨基质不均匀、骨髓大面积脂肪细胞化等病灶,相较模型组而言无显著变化;阳性药阿仑膦酸钠对模型大鼠行为学指标没有改善作用,在组织病理方面的药效作用也不明显。 结论:①短期激素应用和长期激素应用均能造成股骨头坏死模型,且不受雌鼠体内激素代谢拮抗作用影响,短期急性模型比长期慢性模型更贴近早期股骨头坏死症状; ②激素性股骨头坏死能改变动物行为学指标,可能与肾阳虚证有关; ③侧耳水提物对激素性股骨头坏死早期模型有显著治疗作用,且能改善大鼠行为学指标,发挥整体药效作用;侧耳醇提物对模型大鼠没有治疗作用,也没有明显改善行为学指标的效果,说明侧耳抗股骨头坏死相关的药效物质主要是水溶性成分,集中在其水提物中。