【摘 要】
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1. Sup35-Vip3A融合蛋白纳米线的制备-营养期杀虫蛋白(Vip)是苏云金芽胞杆菌(Bt)在营养生长期分泌的一类杀虫蛋白,与依赖芽胞而形成的杀虫晶体蛋白不同,它从对数期即开始表达
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1. Sup35-Vip3A融合蛋白纳米线的制备-营养期杀虫蛋白(Vip)是苏云金芽胞杆菌(Bt)在营养生长期分泌的一类杀虫蛋白,与依赖芽胞而形成的杀虫晶体蛋白不同,它从对数期即开始表达,一直持续到芽胞期。属于Vip3A类的Vip3Aa对甜菜夜蛾和小地老虎具有很高的毒力活性。Sup35是酿酒酵母的翻译终止因子,其朊蛋白结构域在体内外能形成淀粉样蛋白纤维。Sup35朊蛋白结构域自组装成纳米线的能力在生物技术和纳米材料等方面已得到广泛的应用。本研究将Sup351-61片段分别与营养期杀虫蛋白Vip3Aa和连接有小分子荧光检测标签——四半胱氨酸标签(tetracysteine tag, TC tag)的营养期杀虫蛋白Vip3Aa融合。实验表明,融合Sup351-61片段与营养期杀虫蛋白Vip3Aa后,可使Vip3Aa蛋白自组装成蛋白纳米线。Vip3Aa高浓度地展示在纳米线表面后能否提高其杀虫活性以及Vip3Aa在昆虫体内的消化过程正在研究中。2.苏云金芽胞杆菌CT-43基因组的分析苏云金芽胞杆菌中华亚种CT-43对鳞翅目和双翅目昆虫具有较高的毒性。它可以形成Cry1Aa3、CrylBa1、CrylIal4、Cry2Aa9和Cry2Abl多种伴胞晶体。在发酵过程中,CT-43菌株可同时分泌营养期杀虫蛋白Vip3Aal0以及杀虫核苷酸类似物苏云金素。本研究根据CT-43菌株的基因组注释结果,将与转录因子、Sigma因子、噬菌体、转座子、插入序列和芽胞形成相关基因进行了归类与分析。同时,利用生物信息学方法从CT-43菌株的基因间隔区预测出258个假定的sRNA (small RNA),并对其中的25个sRNA的二级结构及其上下游的操纵子进行了初步分析。这些工作为进一步研究CT-43菌株代谢调控机制奠定了一定的基础。
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