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镍是一种过渡金属，易致癌，也有免疫调节作用。免疫器官是镍化物发挥毒性作用的重要靶器官。然而，镍化物对免疫系统的毒性机制到目前为止还不是很清楚。因此，在本研究中，我们尝试整合多种生物学分析方法，从细胞、分子水平上来探讨氯化镍诱导T淋巴细胞凋亡的机制。
本研究首先分析了氯化镍对jurkat细胞的毒性效应。采用体外培养jurkat细胞，不同剂量(0～80μg/ml)分别作用6h，12h，24h，苔盼兰拒染法测细胞存活率。结果显示：随着氯化镍浓度的增加和作用时间的延长，细胞存活率明显降低，当80μg/ml的氯化镍作用24h，细胞存活率仅为6.5％。
细胞死亡的途径有两种：凋亡和坏死。到底是哪种呢?我们采用Hoechst荧光染色法检测镍处理后的细胞形态，发现了细胞皱缩、染色体聚集和凋亡小体出现等凋亡的典型特征。运用Annexin-V—PI双染色法和PI单染色法定量检测凋亡，我们发现死亡细胞中凋亡细胞的比率占了绝大部分，且效应与镍的剂量和作用时间呈正相关。以上三种方法从不同角度在细胞水平上证明了氯化镍作用引起的细胞死亡是凋亡途径。
利用罗丹明123结合流式细胞仪分析，发现在氯化镍诱导细胞凋亡的过程中，线粒体跨膜电位(△ψm)明显下降，且随作用时间延长和浓度增加效果越加明显，而且镍作用细胞24小时后膜电位甚至出现不可逆崩溃。结果显示在凋亡过程中，线粒体功能受到了影响。
为了从分子水平进一步阐述氯化镍引起jurkat细胞凋亡的机制，我们利用RT—PCR和ELISA技术检测了6cl-2基因转录情况和蛋白表达情况。RT—PCR结果显示：氯化镍处理六小时后，60μg/ml组6cl-2基因的转录下调；十二小时后，各浓度组bcl-2基因的转录都下调，且呈浓度依赖关系。相应地，ELISA实验证实Bcl-2蛋白表达量下降。这表明氯化镍引起的jurkat细胞凋亡与bcl-2有关。
一氧化氮是一种多功能小分子。最近文献报道，它在凋亡途径中起着举足轻重的作用。采用Griess试剂法检测一氧化氮浓度，我们发现镍作用六小时后，jurkat细胞中一氧化氮表达量增加。结果表明一氧化氮可能是镍毒性作用的效应因子之一。
总之，我们目前的实验结果证明氯化镍可通过凋亡途径引起细胞死亡。而细胞凋亡与bcl-2基因表达的下调、一氧化氮的增加和线粒体损伤有一定的关系。