【摘 要】
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目的:通过观察高温氧化作用对人晶状体上皮细胞内热休克蛋白质(HSP)表达的影响,来探讨白内障的发病机制,试图证明HSP27、HSP70可能参与了对晶状体的保护作用。方法:人HLB-C3
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目的:通过观察高温氧化作用对人晶状体上皮细胞内热休克蛋白质(HSP)表达的影响,来探讨白内障的发病机制,试图证明HSP27、HSP70可能参与了对晶状体的保护作用。方法:人HLB-C3细胞系(由中国医科大学附属第一医院的眼科学系提供)含15%的小牛血清在DMEM37℃培养箱里培育。培育后的晶状体细胞分为对照组和两个实验组(Ⅰ、Ⅱ),实验组Ⅰ在高温(45℃)条件下培养30分钟后,于不同时间段(0 h,2 h,4 h,6 h,16 h,24 h)采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HSP27mRNA、HSP70mRNA的水平,实验组Ⅱ在氧化(50mmol/LH2O2)条件培养30分钟后,恢复至正常条件下,在生物介质中恢复于不同时间段(0h,2h,4h,6h,16h,24h),采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HSP27mRNA、HSP70mRNA的水平,对照组于不同时间段(0h,2h,4h,6h,16h,24h),采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HSP27mRNA、HSP70mRNA的水平,以β-actin作为内参校正,并对获得的指标进行统计学分析。结果:生理状态下和高温、氧化状态下均有热休克蛋白质的表达,高温应激和氧化应激后2小时导致HSPmRNA的水平增加。统计分析发现HSP27、HSP70高温组和氧化组的表达明显高于对照组,有显著性差异(p< 0.05)。并且每组HSP27mRNA、HSP70mRNA的表达到达峰值的时间间隔从2h到6h不等。以后逐渐降低,但是他们全部在16h仍维持较高水平。结论:HSP在晶状体上皮细胞里存在,并且在应激之后可被诱导产生。数据表明它可能在高温、氧化状态下对晶状体上皮细胞起重要保护作用。
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