【摘 要】
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通过连续多代回交的方法把来自不同原始品种的水稻广亲和基因S5n导入典型籼稻品种南京11和典型粳稻品种巴利拉中,同时将来自典型籼稻品种南特号的等位基因S5i导入粳稻巴利拉中,获得近等基因系。对构建近等基因系过程中的测交群体进行小穗育性考察,同时利用这些近等基因系配制三交群体,考察三交群体中各个单株的小穗育性,研究广亲和基因S5n的遗传效应。本课题组已经将广亲和基因S5n定位于第6染色体上BAC克隆A
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通过连续多代回交的方法把来自不同原始品种的水稻广亲和基因S5n导入典型籼稻品种南京11和典型粳稻品种巴利拉中,同时将来自典型籼稻品种南特号的等位基因S5i导入粳稻巴利拉中,获得近等基因系。对构建近等基因系过程中的测交群体进行小穗育性考察,同时利用这些近等基因系配制三交群体,考察三交群体中各个单株的小穗育性,研究广亲和基因S5n的遗传效应。本课题组已经将广亲和基因S5n定位于第6染色体上BAC克隆AP003458上的50kb范围内。本实验中以两个最近的标记J13、J17作为起点,利用已有的分布于该区段内的5个标记和新发展的2个标记对近等位基因系以及由近等基因系构建的三交F1群体进行了检测,企望将广亲和基因S5n定位在更小的区间内。
初步结果如下:(1)广亲和基因S5n能够提高籼粳杂种小穗育性30%左右。
(2)广亲和基因S5n基本能够将籼稻南京11/粳稻巴利拉杂种F1的小穗育性提高到正常水平。
(3)对近等基因系的分子检测未能在J13~J17范围内找到重组体,但检测验证了已有的定位结果,证明将广亲和基因S5n定位于J13~J17内是正确的。
(4)在用近等基因系构建的三交群体中发现4个植株在原先定位的50kb区域内发生了双交换。双交换将广亲和基因所在的50kb区域分为22kb和25kb两段。
(5)用基因预测软件FGENESH,对这两区段进行基因预测。J13~Z3的22kb范围内,有两个基因,一个位于负链,一个位于正链。负链的基因编码一假定蛋白,正链的基因编码真核生物天氡氨酸蛋白酶。J16~J17的25kb范围内.有四个开放阅读框,全都位于负链上。第一个基因编码的蛋白与Tic22具有很高同源性;第二个基因编码一假定蛋白;第三个基因编码一未知蛋白;基因四与纤维素合成酶蛋白基因同源。天氡氨酸蛋白酶基因最有可能是广亲和基因S5n的候选基因。
此结果将对S5n的克隆以及利用分子标记对水稻广亲和性进行辅助选择具有一定意义。
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