双波长点阵激光对动物皮肤胶原、TGF-β1的影响研究

来源 :温州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yinlei102
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目的:研究双波长点阵激光照射后SD大鼠皮肤胶原含量的变化,及胶原蛋白随时间的变化规律;同时对SD大鼠皮肤TGF-β1分布及点阵激光照射后TGFβ1的变化趋势进行观察,以进一步阐明点阵激光嫩肤的机制。  方法:随机选取20只雌性SD大鼠,两侧背侧皮肤去毛,以一侧为点阵激光照射实验组,对侧背部皮肤作对照组。Affirm点阵激光机(美国Cynosure公司),具有联合顶点脉冲技术(combined apex pulse),采用治疗光斑:14mm(MP350),治疗能量密度:1440 nm波长3.0 J/cm2,1320 nm波长7.5 J/cm2,脉冲时间2 ms。治疗时同时启动冷却风机(SmartCool美国Cynosure公司)。照射治疗侧皮肤,并于治疗后1d、1w、2w、3w、4w、6w、8w分别对治疗侧和对照侧皮肤取材进行HE染色,观察比较治疗组与对照组皮肤的胶原含量以及成纤维细胞的数量变化趋势,并进行皮肤胶原蛋白免疫组化染色,观察不同时间点上胶原含量的变化及计量分析。对SD大鼠皮肤TGF-β1蛋白的免疫组化染色分析,进一步了解双波长点阵激光照射后TGF-β1的变化规律。  结果:1、HE染色观察发现正常大鼠皮肤的真皮胶原在点阵激光照射前纤细、稀疏,并且排列紊乱,成纤维细胞数目较少。经双波长点阵激光治疗术后2w、3w、4w、6w和8w时治疗组比对照组大鼠皮肤真皮胶原显著增生。在大鼠皮肤真皮层中胶原沉积明显,表现为胶原增粗,新生胶原顺序排列有序,走向大致与表皮力向平行且成纤维细胞明显增多。  2、皮肤胶原蛋白在双波长点阵激光照射前后做免疫组化测定,结果显示治疗组真皮层胶原蛋白含量明显高于对照组,组间因素差异有统计学意义(F=55.4,P<0.001)。随时间变化皮肤胶原增生变化趋势,治疗组与对照组比较差异有统计学意义(F=4.3,P<0.001)。治疗组点阵激光照射后SD大鼠皮肤胶原增生随时间逐渐增强并于6周达到高峰,对照组皮肤胶原含量随时间变化无明显改变。  3、TGF-β1于正常老化大鼠皮肤表达较少,大部分在细胞的外结缔组织基质中。此外皮肤的上皮细胞、附属器毛囊上皮和皮脂腺分泌细胞等也有较少量表达。双波长点阵激光照射可以有效刺激大鼠皮肤TGF-β1分泌,治疗组表达明显活跃于对照组,在细胞外结缔组织中可观察到阳性产物。阳性表达区域可见成纤维细胞数量明显增多。在点阵激光照射后一周内即出现TGF-β1明显上调,4周时达到最大值,时间上总体较早于皮肤胶原的增生。  结论:双波长点阵激光治疗后促进大鼠皮肤TGF-β1的表达,从而刺激真皮层胶原增生及重排,达到皮肤老化状态的改善。木实验进一步阐明了点阵激光嫩肤的发生机制。
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