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根据已发表的TMV基因组的核苷酸序列设计5对简并引物,以感染TMV的地黄(Rehmannia glutinosa)叶片总RNA为模板,经RT-PCR扩增获得TMV-RH的5个核苷酸片段的cDNA。分别将其克隆到pMD-18-T vector上,得到5个含有目的cDNA片断的重组质粒。对重组质粒的测序结果表明,这5个片段相互重叠并覆盖TMV全基因组,经拼接后获得了TMV-RH的近全长基因组序列。根据已测得的6000bp核苷酸序列与TMV-U1株系的比较结果可知,TMV-RH基因组含有4个开放阅读框(O