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目的： 银屑病基因组存在不稳定性，PML基因在维护基因组稳定性中具有关键性作用。本研究拟深入分析PML基因在银屑病患者血液系统中的表达与功能，检测PML基因突变以及PML蛋白与凋亡相关蛋白的表达及相关性，鉴定是否存在致病意义的PML基因突变，评估相应突变对基因组稳定性的影响，从而揭示PML基因在维护银屑病基因组稳定性中的可能作用机制。 材料与方法： 1.实验一:收集30例银屑病患者，年龄18-65岁，平均(40.25±12.80)岁，患者均抽取2mlEDTA抗凝血，提取DNA，进行PCR扩增，采用琼脂糖凝胶电泳和直接测序法筛查PML基因第9外显子的突变情况。 2.实验二:收集24例银屑病患者和20例正常对照者，银屑病组年龄18-60岁，平均(37.35±11.25)岁。正常对照组，来自朝阳医院健康医护人员，均无器质性疾患，年龄23-58岁，平均(35.43±10.35)岁，年龄与寻常型银屑病患者组无统计学差异。银屑病患者及正常对照均抽取EDTA抗凝血2ml，从分子生物学的水平采用RealtimeRT-PCR方法检测外周血淋巴细胞PML、P53、Bcl-2及BaxmRNA的表达情况。 3.实验三:收集25例银屑病患者和15例正常对照者，银屑病组年龄18-60岁，平均(37.35±11.25)岁。正常对照组，来自朝阳医院健康医护人员，均无器质性疾患，年龄23-58岁，平均(34.43±9.63)岁，年龄与寻常型银屑病患者组无统计学差异。银屑病患者及正常对照均抽取EDTA抗凝血2ml，采用流式细胞仪检测外周血淋巴细胞PML、P53、Bcl-2、Bax蛋白平均荧光强度值。 结果： 1.实验一:(1)提取30例入选银屑病患者的血液DNA，对第九外显子进行PCR扩增，扩增产物于2％琼脂糖凝胶电泳，寻找非特异条带。银屑病组及正常对照组电泳图提示均在400bp及600bp出现清晰条带，未见非特异条带。(2)PCR扩增产物直接测序，测序结果与人类基因组PML基因序列比较，结果发现:其中1例银屑病患者基因序列正向在96碱基存在套峰与目标序列存在差异，经分析该位点为1个SNP位点(C→T，RS＃5742915)。 2.实验二:24例银屑病患者和20例正常对照外周血淋巴细胞PML、P53、Bcl-2、及BaxmRNA的表达情况:(1)实验中获得外周血淋巴细胞密度均在0.5～1×106/ml，活细胞百分率90％以上，符合实验要求;(2)RealtimeRT-PCR结果提示:银屑病组外周血淋巴细胞PML、P53、Bcl-2、BaxmRNA的平均RQ值分别为:14.98±3.64，1.14±0.42，0.54±0.30，0.42293±0.36，正常对照组分别为:5.50±1.10，0.82±0.30，0.88±0.20，0.87±0.30，T值分别为16.79，2.219，-2.903，-2.907，p＜0.05，银屑病组PML、P53mRNA表达高于正常对照组，而Bcl-2、BaxmRNA表达低于正常对照组，差异有统计学意义。 3.实验三:25例银屑病患者和16例正常对照外周血淋巴细胞PML、P53、Bcl-2、Bax蛋白的表达情况，流式结果提示:银屑病组外周血淋巴细胞PML、P53、Bcl-2、Bax蛋白的平均荧光强度分别为:3.13±0.27，3.47±0.29，3.99±0.29，9.38±0.27;正常对照组分别为:2.43±0.21，2.90±0.21，4.75±0.3148,8.32±0.43,T分别为6.93,4.68,-6.82,7.00,p＜0.05,银屑病组PML，P53，Bax蛋白的表达高于正常对照组，而Bcl-2蛋白的表达低于正常对照组，差异有统计学意义。 4.使用SPSS17.0统计PML与P53，Bcl-2，Bax的相关性，Pearson系数分别为0.882，0.764，0.741，p值均小于0.05，差异有统计学意义。 结论： 1.发现银屑病PML基因第9外显子一个突变位点，经分析该位点为一个SNP位点(C→T，RS#5742915)，该SNP是否和银屑病的易感性相关，有待增加样本量进一步研究，且本实验只检测了第9外显子，下一步可检测其他外显子是否存在SNP。 2.银屑病组外周血淋巴细胞PML、P53表达高于正常对照组，而Bcl-2、BaxmRNA表达低于正常对照组;银屑病组外周血淋巴细胞PML，P53，Bax蛋白的表达高于正常对照组，Bcl-2蛋白的表达低于正常对照组。 3.银屑病组外周血淋巴细胞PML蛋白与P53，Bcl-2，Bax蛋白的表达呈正相关性。 PML基因在银屑病的发病中发挥着一定的作用，且推测其是通过P53、Bcl-2，Bax等凋亡相关蛋白发挥其生物学作用的。