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目的:观察选择性环氧合酶-2抑制剂罗非昔布(Rofecoxib)对胃腺癌细胞SGC7901的生长抑制作用,并探讨其可能的作用机制。
方法:1、MTT法、PCNA免疫细胞化学染色观察罗非昔布对胃腺癌细胞SGC7901增殖的影响。
2、放免法检测细胞分泌前列腺素E2(PGE2)的水平。3、免疫细胞化学染色研究bcl-2、bax及c-myc基因表达的改变。4、流式细胞术观察罗非昔布对SGC7901细胞细胞周期的影响。
结果:1、罗非昔布对SGC7901细胞的增殖有明显的抑制作用,以1×10-5mol/L最为明显,各浓度组间比较亦有显著性差异,在10-9mol/L~10-5mol/L浓度范围,罗非昔布对SGC7901细胞株增殖的抑制作用随浓度的增高而增强(p<0.05)。与对照组相比,10-10mol/L的罗非昔布对SGC7901的增殖无明显影响(p>0.05)。10-5mol/L罗非昔布作用后SGC7901的细胞增殖核抗原(PCNA)表达明显降低。。
2、SGC7901细胞的培养上清液中可测出PGE2,在培养液中加入罗非昔布后,PGE2的含量明显减少,其减少程度随罗非昔布浓度的加大而增大,说明罗非昔布能抑制SGC7901细胞分泌PGE2,药物浓度越高抑制作用越强。
3、细胞经罗非昔布作用后,bcl-2的表达自用药3小时起有明显下降,6、12小时最明显,c-myc的表达自用药6h时起显著升高,12、24h最明显,而bax的表达无明显改变。
4、1×10-5mol/L这一浓度的可诱导SGC7901细胞出现G0/G1阻滞,于加入罗非昔布6h后开始(56.40%±3.92%),24h最显著(67.11%±3.12%),36h已消失;与对照组(13.46%±1.54%)相比,24hG2/M期细胞比例亦减少(6.98%±0.96%)。
结论:选择性COX-2抑制剂罗非昔布在体外对胃癌细胞SGC7901的增殖有明显的抑制作用。其可能机制包括:(1)罗非昔布显著抑制胃癌细胞SGC7901分泌PGE2;(2)罗非昔布明显抑制胃癌细胞SGC7901表达bcl-2基因,诱导c-myc基因的表达有,但对bax的表达无作用;(3)罗非昔布诱导胃癌细胞SGC7901出现G0/G1期阻滞。