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目的:USP22是一种新的肿瘤标记物,本研究探讨USP22在人胃癌细胞BGC-823,肠癌细胞系LS174T的表达状况,以及用胃癌细胞系和肠癌细胞系在不同的裸鼠建立胃癌原位模型后,检测两种癌组织中USP22的表达状况,进一步探讨USP22是否是肿瘤干细胞标记物,其表达与增殖、侵袭、转移的关系。
材料方法:人胃癌细胞系BGC-823购自于中国科学院上海细胞库,肠癌细胞系LS174T由哈医大三院肿瘤所惠赠。裸鼠肿瘤模型由前期课题组完成,5周龄14只BALB/C裸小鼠购自上海斯莱克实验动物有限公司。USP22多克隆抗体来自于Abcam公司。
培养两种细胞,做细胞爬片,用免疫荧光技术检测USP22在两种细胞系的表达情况。提取两种细胞蛋白,用Western Blot检测USP22在两种细胞系的表达情况。取两种肿瘤模型的癌组织,制成切片,用免疫荧光技术检测两种癌组织USP22的表达情况。
结果:在倒置显微镜下,两种细胞系生长状态良好。在免疫荧光检测中,胃癌细胞系BGC-823中的USP22的表达量多于肠癌细胞系LS174T,Western blot结果和免疫荧光结果相符合。在MTT实验中,BGC-823增殖能力强于LS174T。两种细胞系在体内成瘤成功率高。USP22在胃癌细胞系BGC-823成瘤组织的表达也高于肠癌细胞系LS174T成瘤组织。
结论:USP22在胃肠两种癌细胞系都是有表达的,而且在胃癌的表达多于肠癌,在两种细胞系建立的癌组织模型也得到了同样的结果,提示USP22可能是癌干细胞一种新的标记物。在MTT实验中,胃癌的细胞增殖能力大于肠癌细胞,提示USP22的表达与细胞的增殖能力可能成正相关,即USP22高表达代表细胞或组织的增殖分裂能力强,这为癌组织生物学相关性研究提供了一定的依据。