JNK信号通路对NKG2D介导的NK细胞肿瘤杀伤效应的研究

• 作 者: 张晓卿
• 机 构: 南开大学
• 出 处: 南开大学
• 发表日期: 2015年期
• 关键词: 固有免疫 信号通路 免疫应答 磷酸化水平

固有免疫是一类主要针对病原体相关分子模式的重要免疫系统。较之适应性免疫，具有非特异性和应答快速的特点。自然杀伤细胞(NK细胞)是固有免疫的重要组成部分，在早期宿主抗病毒反应和肿瘤免疫监视中起重要作用，同时在固有免疫和适应性免疫的建立和调节过程中起关键的作用。NK细胞的效应功能是由细胞所接受的抑制信号和激活信号平衡来调节的。　　NK细胞表达许多激活受体，NKG2D，是NKG2家族的成员，为Ⅱ型C凝集素样受体。NKG2D无需抗原呈递即可识别肿瘤细胞表面的配体分子，进而激活或协同刺激效应细胞，从而发挥杀伤作用。目前已经发现多种NKG2D配体，种属包括人类和小鼠。　　c-Jun氨基末端激酶(JNK)是丝裂原活化蛋白酶(MAPK)家族的一员。JNK信号通路激活后，参与和调节一系列生命活动。JNK在适应性免疫尤其B细胞和Th细胞中的作用已经研究得较为广泛和深入，但是对固有免疫的相关研究仍较为薄弱，尤其是针对NK细胞的发育、效应和凋亡的调控作用，相关的研究仍处于空白阶段。本课题以此为切入点，借助JNK1-/-和JNK2-/-小鼠模型，探索JNK对NK细胞免疫应答的调控作用及其调控机制。　　实验结果表明，体内实验发现JNK1-/-、JNK2-/-及WT小鼠对鼠T淋巴细胞瘤RMA的控制没有明显的差异，但是对表达NKG2D配体的RMA-MULT1细胞瘤，JNK1-/-、JNK2-/-小鼠的控制能力较之WT降低，JNK1-/-小鼠更明显。在荷瘤过程中各个品系的小鼠纯体重没有明显差异。体外细胞毒性实验进一步佐证。采用细胞流式分析法证实了JNK1、JNK2缺失后，小鼠NK细胞分泌IFN-γ，颗粒酶B能力明显降低，同时NK细胞表面的NKG2D的表达水平有所降低，但是激活受体Ly49D、Ly49H的表达水平增加或没有差异。本项研究还进一步检验了不同类型小鼠NK细胞内JNK信号通路上下游激酶的表达情况及其磷酸化水平的程度，此外还对MAPK另外的两条信号通路ERK1/2、P38的表达水平和磷酸化水平进行了检验。