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骨髓间充质干细胞是骨髓中不同于造血干细胞的一类细胞，其取材简便，易分离、纯化、培养，在一定的条件下可以迅速体外扩增，具有多向分化潜能，可以通过不同的方法被诱导分化成骨细胞、软骨细胞、肌细胞、神经胶质细胞、神经元细胞等，而且它具有低免疫源性，向病变部位迁移的能力，并与局部的组织有良好的整合性，若能探明其向神经细胞转化的机制，精确调控细胞的分化、迁移、功能改变等，神经系统疾病的治疗必能进入个全新境界。目前干细胞分化机制倾向于通过多条信号通路来调节基因的表达。Wnt信号通路调节控制着许多生命过程，包括生物体的生长、发育、疾病、衰老与死亡等；也包括细胞形态与功能的分化与维持、免疫、应激、细胞癌变与细胞凋亡等。目前发现其经典Wnt信号通路可作用于目前所有已确定的人体的干细胞，但其作用却由于细胞的种类和状态而不同。在骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化过程中，经典Wnt信号通路究竟起着什么作用，机制有待进一步研究。
目的：本研究通过诱导骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化，并检测经典Wnt信号通路重要分子变化情况，以期明确经典Wnt信号通路对骨髓间充质干细胞分化的作用，并为其具体作用机制研究奠定基础。
方法：1、通过贴壁法分离培养SD大鼠骨髓间充质干细胞。2、取P5代细胞种植于6孔板，用10ng/ml bFGF预诱导24小时后，改为10ng/ml bFGF+10ng/mlEGF+0.5ug/ml RA诱导骨髓间充质细胞向神经样细胞分化。并设立不同种植密度组，选择最适合分化种植密度。3、采用实时定量PCR方法，检测诱导前和诱导后1，3，5天Wnt3变化情况，并设立空白组对比。
结果：1、通过贴壁法分离培养SD大鼠骨髓间充质干细胞，5代后细胞呈均一梭形漩涡样生长，免疫组化鉴定CD34-，CD45-，CD90+。2、细胞加入诱导剂后出现胞体回缩，突触变长出现二级突触，并连接成网的现象。Nestin，GFAP，NSE细胞化学染色均呈阳性，8×103个/cm2为最佳分化种植密度。3、空白组和处理组Wnt3分子表达比较，处理组明显降低，差别有统计学意义(P<0.05)。
结论：
1、贴壁法能大量扩增骨髓间充质干细胞。
2、bFGF+EGF+RA能诱导骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化，8×103个/cm2为最佳分化种植密度。
3、在骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化过程中，经典Wnt信号通路受抑制。