【摘 要】
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多药耐药性（multidrug resistance,MDR）是肿瘤化学治疗的主要障碍.该课题构建了多药耐药性肿瘤细胞的噬菌体抗体库,试图从筛选抗多药耐药性肿瘤细胞单链抗体入手,为肿瘤MDR临床
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多药耐药性（multidrug resistance,MDR）是肿瘤化学治疗的主要障碍.该课题构建了多药耐药性肿瘤细胞的噬菌体抗体库,试图从筛选抗多药耐药性肿瘤细胞单链抗体入手,为肿瘤MDR临床诊断提供新型免疫诊断试剂,并为获得治疗性抗体提供基础.用多药耐药性肿瘤细胞KB-A1免疫小鼠,取其脾脏.RT-PCR扩增出VH和VL基因,经重叠延伸反应组装成单链抗体（ScFv）.将其克隆入噬菌粒载体pCANTAB 5E中,构建了库容为0.8×10<6>的噬菌体抗体库.用完整的多药耐药性肿瘤细胞KB-A1细胞进行四轮筛选,噬菌体抗体出现了富集.随机挑选72个克隆进行细胞ELISA鉴定,发现31个与KB-A1细胞有结合活性.并用5种人细胞系对所获得克隆进行了进一步鉴定.多药耐药性的产生主要与P-糖蛋白（P-gp）的过量表达有关,我们克隆和表达了编码P-糖蛋白（P-gp）的MDR1基因片段C21、D2.最后分离纯化得到表达产物C21 1mg、D2 0.5mg.所获得的表达片段可用于抗P-糖蛋白抗体的筛选和鉴定以及P-糖蛋白过量表达引起的多药耐药现象的研究.
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