天蓝色链霉菌中三个ftsk同源基因的功能分析

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链霉菌复杂的生活史是研究其遗传学的一个重要原因,天蓝色链霉菌全基因组测序将会为其形态及生理分化发育的研究提供大量有用的信息,该研究基于天蓝色链霉菌已测出的98﹪序列,对一些可能与细胞分裂有关的基因——ftsk同源基因——进行基因置换或中断并对其功能进行初步研究.通过表型的观察和胞内互补实验来确证基因功能.首先,构建了用于SC6A9.34的基因中断载体pHZ1112和包括了完整SC6A9.34并能在链霉菌中自主复制的载体pHZ1102.将pHZ1112导入野生型菌株M145中获得基因中断菌株HXY1并通过SOUTHERN杂交验证HXY1在正确位置发生了基因中粘.HXY1在MMAsp及R<,5>平板上培养时,在产素及产孢方面与野生型没有明显差异.将pHZ1102以中等拷贝转化到J1702和J1700两种BLDA突变株中发一周pHZ1102不能抑制它们的光秃表型.其次,构建了另一个用于置换SCQ11.17/SCD78.01的置换载体pHZ1117,得到基因置换菌株HXY3并通过SOUTHERN杂交验证,与野生型M145相比,没有观察到HXY3有明显的表型变化.
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