他克莫司经脱敏TRPA1抑制瘙痒的机制研究

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目的:他克莫司(FK506)是一种免疫抑制剂,可外用治疗特应性皮炎,抑制炎症反应并缓解瘙痒。但局部使用他克莫司早期既有刺痒、灼热等副作用。初级感觉神经元细胞上的瞬时电位离子通道TRPA1,是非组胺依赖的外周痒觉传导途径中的重要通道。我们想探究他克莫司除了抑制炎症反应之外,其止痒与致痒的作用与副作用的神经源性机制,并且该机制是否与TRPA1有关。
  方法:通过对初级感觉神经元的钙成像,明确他克莫司是否可以作用于初级感觉神经元细胞而诱发钙内流。并通过钙成像和全细胞膜片钳技术,观察他克莫司对转染TRPA1的HEK273细胞的钙离子和膜电位变化,明确他克莫司对TRPA1的影响。最后,在小鼠的慢性瘙痒模型中观察他克莫司对小鼠搔抓的影响。
  结果:他克莫司可以直接活化初级感觉神经元细胞和转染TRPA1的HEK273细胞。对转染TRPA1的HEK273细胞的单通道电流记录技术结果显示,他克莫司短时间(1min)给予可激活TRPA1通道,长时间给与(10mins)可抑制TRPA1通道活化。动物实验中他克莫司皮内注射可以直接诱发瘙痒,而连续外用可以缓解SADBE诱发的慢性瘙痒。
  结论:他克莫司局部外用早期的刺痒等不良反应和随后缓解瘙痒的疗效,可能与早期活化TRPA1通道,而后抑制TRPA1通道密切相关。
  目的
  在小鼠中已经证实TRPA1通道是外周痒觉传导通路中的重要通道,本文拟探讨TRPA1在人慢性单纯性苔藓中的表达变化,为进一步研究TRPA1在慢性瘙痒的发生机制提供依据。
  受试者和方法:
  收集2018年6月至2019年2月的共21例皮肤瘙痒超过6周的慢性单纯性苔藓患者的皮损组织和28例正常的皮肤组织。用WesternBlotting、q-rtPCR和免疫组化染色方法检测皮肤组织中TRPA1的表达,比较TRPA1表达水平的差异。
  结果:
  在WesternBlotting中,仅发现慢性单纯性苔藓患者中TRPA1表达显著降低(p<0.01)。免疫组化结果显示TRPA1在皮肤全层均有表达,主要表达在皮肤的基底层和真皮的血管周围,与对照组相比,TRPA1在慢性单纯性苔癣患者中的表达显著降低(p<0.05)。在q-rtPCR的研究中,TRPA1在慢性单纯性苔癣中的表达与对照组相比无统计学意义。
  结论:
  我们为慢性单纯性苔癣患者皮肤组织中TRPA1的下调提供了证据。提示TRPA1在人慢性单纯性苔藓发病机制中起着一定作用。
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