论文部分内容阅读
癌症是严重危害人类健康的一大顽症，因而，设计和合成高效、低毒副作用的新抗癌药物成为当前药物研发领域的热点。同时，药物的快速筛选，在新药设计和研发中发挥着越来越重要的作用，引起人们的广泛关注。特别是计算机虚拟筛选技术在先导化合物的发现中起着不可或缺的关键作用。基于分子对接的虚拟筛选是创新药物研究的新方法和新技术，已成为一种与高通量筛选互补的方法，广泛应用于先导化合物的筛选和发现中。本论文主要围绕药物的分子设计和合成及快速筛选(包括实验筛选和计算机虚拟筛选)展开研究：
第一章：概括介绍了铂类抗癌药物、蛋白激酶抑制剂、多靶点抗癌药物及药物筛选方法的研究进展和本论文的研究目的和内容。
第二章：设计和合成蛋白酪氨酸激酶表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂易瑞沙(iressa)和Abl蛋白激酶抑制剂伊马替尼(imatinib)的类似物；并以此为配体，设计和合成了系列新型铂基多靶点抗肿瘤化合物。
第三章：利用酶联接免疫吸附剂测定(ELISA)和计算机虚拟筛选对合成的易瑞沙(iressa)类似物的EGFR抑制活性进行测试，并定量测定了8种初筛活性较好的合成化合物的IC50值；应用Sybyl软件的Surflex-docking模块，将这些类似物对接到EGFR的活性口袋部位，获得它们的对接分值，预测各个类似物的抑制活性；将结果与ELISA实验结果相比较，分析抑制剂与EGFR间的相互作用，从理论上阐明了iressa衍生物EGFR抑制活性的结构因素。
第四章：结合自制的TiO2纳米颗粒沉积毛细管柱分离富集蛋白激酶的磷酸化肽底物，发展了一种快速、灵敏、低成本的磷酸化肽MALDI-TOF MS定量分析方法，实现了蛋白酪氨酸激酶Abl的小分子抑制剂的快速筛选。该方法用于蛋白激酶抑制剂的快速筛选及IC50值的测定，避免了使用昂贵的生化试剂，如单克隆抗体，放射性同位素标记的ATP等，降低了实验成本。此外，我们设计合成了非同位素标记的磷酸化肽段作为内标，该肽段在选定的实验条件下与磷酸化底物具有相似的质谱响应，进一步降低了实验成本。通过对Abl抑制剂的对接研究，不仅证实了质谱筛选方法的准确性，同时，从结构生物学的角度解释了Abl激酶抑制活性强弱的关键控制因素，即能与Abl激酶的Thr315氨基酸残基形成氢键作用。