黄瓜品种(材料)抗霜霉病鉴定、评价与基因定位研究

来源 :四川农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lili1006
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本文从黄瓜霜霉病菌的孢子囊萌发入手,研究与建立适于四川省域特点的接种、抗病性鉴定与评价方法等一套体系,并定位抗霜霉病基因,以期为抗病育种和生产服务。在孢子囊萌发试验中,5%蔗糖悬浮液中的孢子囊萌发率显著高于无糖悬浮液中的萌发率,表明在悬浮液中加入蔗糖可刺激孢子囊的萌发。低温诱导可显著提高孢子囊的萌发率。将黄瓜霜霉病菌孢子囊悬浮液放置在-70℃和26℃处理5d的叶片病情指数显著低于-20℃、-16℃、-6℃、-4℃、-3℃、3℃、26℃和对照(26℃处理Oh)的病情指数。表明低温处理可保存霜霉病菌,但超低温处理显著降低了病情指数;26℃温度下处理5d与叶片组织的衰败和杂菌丛生有关。室内活体试验中,以104个/mL孢子囊悬浮液在5℃低温下处理2h喷雾接种7d后病情指数均高于其它7个处理;低温诱导的悬浮液利于发病:喷雾接种效果优于注射法和灌根法;104的接种浓度优于103的接种浓度。在室内离体接种试验中,浓度以103个/mL孢子囊悬浮液进行离体叶片的接种,不同品种间就可体现出抗感差异,病情指数最大可达到60.00,发病较充分;叶片背面接种效果优于正面接种,表明叶背面的侵染对于霜霉病菌是最经济、有效的途径;两种保存黄瓜叶片的基质中,保绿培养基比滤纸做保湿基质条件下的发病要充分,且简洁、经济;在5μg/L的浓度下,苯并咪唑可以起到保绿的作用,增加保绿时间,其保绿培养基上的霜霉病菌产孢多,利于快繁、保存和纯化菌种:0.02%吐温20配置的孢子悬浮液的接种效果优于吐温80;在孢子囊悬浮液中加入少量的黄瓜花粉,可促进霜霉病发生。在田间,不同浓度中以104个孢子囊/ml的浓度为宜,采用喷雾较注射、灌根方法的接种效果好;室内活体最优的接种方法与田间相一致,均为喷雾接种法;但田间的接种浓度需高于室内。在大棚中,以5℃处理2h的孢子囊悬浮液接种的病情指数极显著高于另两种方法;材料7312、7296病情指数极显著低于材料7307、7302、7308、7301,材料间抗病性差异明显。在露地中,以5℃处理2h的104个/ml孢子囊悬浮液进行接种病指明显高于对照;8个黄瓜材料的病情指数在8.55~77.06,抗感差异明显。在自然发病鉴定试验中,大多数材料在两地的抗病趋势一致,但材料1在两地的抗病性表现差异较大,表明自然发病鉴定会受到自然环境因素的影响。所以,为鉴定准确性和科学性,以5℃处理2h的104个/ml的孢子囊悬浮液,在田间人工接种参试品种或诱发品种进行抗病性鉴定。根据田间接种试验,筛选出津研四号做为抗病对照品种,二早子做为感病对照品种,并应用于抗性鉴定中。对田间62个黄瓜品种(材料)的病情指数聚类分析,确定了抗性鉴定标准,即在感病对照品种的病情指数为34.06时,以病情指数为参对其他品种的抗感类型进行划分:高抗(HR)≤5,5<抗病(R)≤13,13<中抗(MR)≤19.5,19.5<中感(MS)<25,25<感病(S)<33.5,高感(HS)>33.5。当感病对照品种的病情指数大于等于34.06时,表明发病达到充分。建立了矫正病情指数,并验证了其实用性。矫正病情指数=X年某参试品种(材料)病情指数/(X年二早子品种的病情指数/36.5)。利用矫正病情指数可便于不同年份间抗性品种的比对。生产中抗性品种抗性丧失的三年监测中,抗性品种丧失或减弱的比例为87.50%。在生产中,需注意抗性品种的轮换使用和加强抗性监测和预警。以常规黄瓜品种二早子(感,编号S)与材料8号的纯化系(抗,编号R)杂交,R为父本,S为母本;抗病性鉴定表明抗源R为显性遗传;利用SLAF-seq技术将抗霜霉病的材料R的基因定位在第6条染色体的8,835,226-10,455,046区间,该区间内有115个基因,为下一步的精细定位奠定了基础。
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