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马齿苋为马齿苋科药食两用植物马齿苋(PortutacaoleraceaL.)的干燥地上部分,主要功效为清热解毒、凉血止血。上海中医药大学附属曙光医院蒋健教授临床应用马齿苋及马齿苋蒲公英配伍治疗尿路感染,疗效肯定。本文对马齿苋药材指纹图谱、马齿苋及复方抗尿路感染活性部位、体内药效物质、活性单体成分及代谢产物进行研究,取得以下主要结果: 1、采集了16个产地19个批次马齿苋药材,采用UPLC-DAD方法,对马齿苋药材进行了指纹图谱研究,并对马齿苋药材中杨梅素等4个代表性成分进行了含量测定。结果显示马齿苋不同产地的样品相似度较小,且通过SPSS软件进行的二维排序因子分析,发现同时测定的4个代表性成分,除山东及广西两个产地药材中含量较高外,在其它样品中含量均较低。同时采用SPSS软件将各个批次样品进行聚类分析,结果显示湖北、邵阳2和广西三个批次的样品与其他马齿苋样品差异性较大,应单独分类;另外16个样品由组间相关性可分为两大类,其中北京1、北京2、山东1、山东2、河北1、贵阳、广州和安徽八个样品可以归为一类,另外八个样品归为一类。提示在采购使用马齿苋药材时应注意不同产地药材的差别。 2、采用多种细菌感染、利尿、炎症及免疫低下体内外模型进行马齿苋及马齿苋蒲公英复方配伍的药理活性筛选(注:药理筛选由曙光临床医学院蒋健教授课题组合作完成)。发现单味马齿苋及马齿苋蒲公英复方提取物具有一定的体外抗菌活性,但体内抗菌活性不明显;马齿苋和马齿苋蒲公英复方对二甲苯致小鼠耳肿胀的抗炎作用均较明显;马齿苋提取物对正常大鼠具有较显著的利尿作用,还具有免疫增强作用。进一步研究发现马齿苋所含的主要成分之一杨梅素具有较明显的抗炎和免疫增强作用。 3、采用HPLC-ESI-MSn技术,与药理筛选相结合,对马齿苋蒲公英复方水提物、水提醇沉上清部位、大鼠灌服马齿苋蒲公英复方水提物及水提醇沉上清部位含药尿液的成分进行分析。从马齿苋蒲公英复方水提物中分析鉴定出oleraceinD等8个成分,其中来源于蒲公英的成分1个(chlorogenicacid),来源于马齿苋的成分oleraceinE等7个。从马齿苋蒲公英复方水提醇沉上清液中分析鉴定出betanin等8个化学成分,其中来源于蒲公英的成分1个(chlorogenicacid),来源于马齿苋的成分palmitoleticacid等7个。从大鼠灌服马蒲复方水提物后的含药尿液中分析鉴定出sulfationofcaffeicacid等11个化学成分,其中来源于蒲公英的原形成分1个(caffeicacid);来源于蒲公英的sulfationofcaffeicacid等Ⅱ相代谢产物5个,来源于马齿苋的glucuronidationofoleraceinE等Ⅱ相代谢产物5个。从大鼠灌服马蒲复方水提醇沉上清液后的含药尿液中鉴定出glucuronidationofferulicacid产物等11个化学成分,其中来源于蒲公英的glucuronidationofferulicacid等Ⅱ相代谢产物6个,来源于马齿苋的glucuronidationofoleraceinE等Ⅱ相代谢产物5个。 4、根据药理筛选结果,马齿苋抗炎作用较显著的化学部位为乙醇提取物及醇提物的大孔树脂乙醇沈脱精制部位。采用HPLC-ESI-MS/MS技术,对马齿苋抗炎活性部位及大鼠灌服马齿苋抗炎活性部位后的含药尿液成分进行分析鉴定,从马齿苋抗炎活性部位中鉴定出myricetin等13个成分;从大鼠灌服该部位后的含药尿液中鉴定出10个化学成分,包括myricetin等8个马齿苋原形成分及sulfationofoleraceinE等2个Ⅱ相代谢产物。 5、药理研究表明杨梅素为马齿苋抗炎主要活性成分。采用HPLC-ESI-MSn技术,进行大鼠灌服杨梅素单体成分后的体内代谢产物研究。从大鼠灌服该化合物后的血液中鉴定出methylmyricetin等2个Ⅱ相代谢产物;从大鼠灌服杨梅素后的尿液中鉴定出原形成分、1个Ⅰ相代谢产物(3,5-dihydroxyphenylaceticacid)和methylmyricetin等5个Ⅱ相代谢产物;从大鼠灌服该成分后的粪便中鉴定出原形成分,2个Ⅰ相代谢产物(3,5-dihydroxyphenylaceticacid、3,4,5-trihydroxyphenyl-aceticacid)和2个Ⅱ相代谢产物(monomethylmyricetin、tetradmethylmyricetin)。 6、上述研究工作已发表(包括接收)论文3篇,其中SCI论文2篇(另有一篇SCI论文已投稿)。