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第一部分负载TMZ的新型纳米粒的构建及靶向黑色素瘤细胞的研究 目的：制备负载替莫唑胺（TMZ）的具有主动靶向性的新型纳米递释系统，并进行表征。探索其体外对人黑色素瘤 A375细胞的靶向性。 方法：1.新型纳米靶向递释系统PAMAM-PEG-GE11的构建：将NHS-PEG-MAL的一端活性基团（-NHS)与PAMAM的氨基（-NH2)通过酰胺反应进行连接，另一端活性基团（-MAL)与靶向剂GE11的巯基（-SH)连接，合成PAMAM-PEG-GE11纳米载体，并对其进行鉴定、表征。后用异硫氰酸荧光素(FITC)修饰PAMAM,进一步合成FITC-PAMAM、FITC-PAMAM-PEG、FITC-PAMAM-PEG-GE11，荧光倒置显微镜和流式细胞术观察人黑色素瘤细胞A375对各纳米材料的摄取。2.纳米载体对抗黑色素瘤烷化剂TMZ的负载：用纳米载体复合物PAMAM-PEG-GE11包埋抗黑色素瘤烷化剂 TMZ，并对其粒径、Zeta电位、形貌以及包封率和载药量进行考察。最后体外探索药物纳米递释系统的靶向性。 结果：成功构建药物纳米靶向递释系统TMZ-PAMAM-PEG-GE11-HA，平均粒径为183.2nm和 Zeta电位为-0.01mv;载药量为50.63%,包封率为10.4%。且显示TMZ-PAMAM-PEG-GE11-HA纳米复合物能靶向于黑色素瘤细胞A375。 结论：成功构建了 TMZ-PAMAM-PEG-GE11-HA纳米递释系统，并且证明其在体外具有靶向运送到黑色素瘤细胞的潜力，有望增强人黑色素瘤细胞 A375对 TMZ的敏感性，为黑色素瘤的治疗提供一种有前景的靶向给药系统。 第二部分多功能近红外荧光染料-磁性纳米粒用于成像和黑素瘤治疗的体外研究 目的：制备具有诊疗一体化功能的新型纳米粒，对其进行表征，并探索其在体外的MRI成像和对人黑素瘤A375细胞的光热/光动力治疗作用。 方法：1.新型多功能纳米粒IR820-CS-Fe3O4的构建：高温沉淀法合成CS-Fe3O4纳米粒，连接IR820，合成IR820-CS-Fe3O4纳米粒，并使用DLS、TEM、X-射线能谱仪对其进行鉴定、表征。2.测定IR820-CS-Fe3O4纳米粒的吸收谱，检测其稳定性。3.检测IR820-CS-Fe3O4纳米粒的T1/T2磁共振成像能力。4. CCK-8法测定纳米粒对 A375细胞的毒性；用异硫氰酸荧光素(FITC)修饰 CS-Fe3O4，进一步合成FITC-CS-Fe3O4，流式细胞术结合激光共聚焦显微镜测定纳米粒的摄入和细胞内定位；用于恶性黑素瘤治疗：808nm激光器照射摄入纳米粒的肿瘤细胞，Live-Dead法测定近红外激光下光热/光动力治疗后细胞死亡情况。 结果：成功构建诊疗一体化纳米粒IR820-CS-Fe3O4，平均水合粒径为24.3nm， Zeta电位为41.5mV，材料具有良好的稳定性。MRI结果显示了IR820-CS-Fe3O4良好的T1/T2成像效果。CCK-8法测定纳米粒对A375细胞无明显的细胞毒性。流式细胞术结果显示人黑素瘤细胞A375对FITC-CS-Fe3O4的摄入呈浓度依赖性。激光共聚焦显微镜结果显示摄入细胞后纳米粒定位于溶酶体。近红外激光照射后，发挥光热疗/光动力治疗作用，有效杀伤恶性黑素瘤细胞。 结论：成功设计并构建了多功能诊疗一体化纳米粒 IR820-CS-Fe3O4，并且证明其在体外具有良好的MRI成像和光热/光动力治疗作用，为黑素瘤的有效诊治提供一种有前景的纳米诊疗系统。