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【研究背景】
卵巢癌是女性生殖系统中的三种主要恶性肿瘤之一。其死亡率在所有妇科肿瘤中最高。因为其起病隐匿，转移性强，预后极差，在过去几十年中，卵巢癌的5年生存率仅为28%-40%，如何更快更准的预防、诊断和治疗卵巢癌一直临床治疗亟待解决问题。microRNA是一类由内源基因编码的长度约为19-22个核苷酸的非编码单链小分子RNA，通过与靶基因RNA(mRNA)特异性碱基配对，miRNA引起靶mRNA的降解或抑制其翻译，从而调节各种细胞过程。越来越多的研究表明，miRNA表达异常在卵巢癌的发展中起着重要作用。
【研究目的】
miR-216b-5p在多种组织中已被证实是一种肿瘤抑制因子，而在卵巢癌中尚未报道。因此，本研究探讨了miR-216b-5p在卵巢癌中的表达和生物学功能，以期为卵巢癌发生的机制提供线索，为卵巢癌的诊断和治疗提供新的靶点。
【研究方法】
1.通过荧光探针原位杂交方法在卵巢癌组织芯片中检测miR-216b-5p的表达情况；
2.通过实时定量PCR检测正常卵巢上皮细胞与卵巢癌细胞中miR-216b-5p的相对表达量；
3.在卵巢癌细胞中过表达与下调miR-216b-5p，分别通过CCK8、流式细胞增殖实验、流式细胞凋亡实验、细胞划痕实验和transwell侵袭实验验证miR-216b-5p的生物学功能；
4.通过生物学信息学软件和查阅文献，预测miR-216b-5p的靶基因FOXM1及其结合位点；
5.通过免疫组化方法在卵巢癌组织芯片中检测FOXM1的表达情况，并分析FOXM1与miR-216b-5p的相关性；
6.通过实时定量PCR和Westernblot检测正常卵巢上皮细胞与卵巢癌细胞中FOXM1的表达水平；
7.通过双荧光素酶报告基因检测验证miR-216b-5p与靶基因FOXM1的结合；
8.在卵巢癌细胞中过表达与下调miR-216b-5p，通过实时定量PCR和Westernblot检测靶基因FOXM1的表达情况。
【研究结果】
1.miR-216b-5p在卵巢癌组织中的表达水平显著低于正常输卵管组织。根据FIGO分期，随着卵巢癌从早期进展至晚期，miR-216b-5p的表达量逐渐减少；
2.miR-216b-5p在卵巢癌细胞中的表达水平显著低于正常卵巢上皮细胞；
3.过表达miR-216b-5p能够显著抑制卵巢癌细胞的恶性增殖、迁移侵袭能力；
4.下调miR-216b-5p能够显著促进卵巢癌细胞的恶性增殖、迁移侵袭能力；
5.FOXM1在卵巢癌组织中的表达水平显著高于正常输卵管组织；
6.通过spearman相关系数分析显示，miR-216b-5p与FOXM1的表达水平呈负相关，且相关性具有统计学差异；
7.FOXM1在卵巢癌细胞中的表达水平显著高于正常卵巢上皮细胞；
8.双荧光素酶报告基因检测证实FOXM1mRNA的3′-UTR确实是miR-216b-5p的直接靶标；
9.在卵巢癌细胞中过表达miR-216b-5p可以降低FOXM1的表达水平；
10.在卵巢癌细胞中下调miR216-5p可以升高FOXM1的表达水平。
【结论】
miR-216b-5p能抑制卵巢癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力，miR-216b-5p可以与FOXM1靶向结合，在卵巢癌中调节FOXM1的表达。miR-216b-5p可能在卵巢癌中发挥着潜在的抑癌作用，有望成为卵巢癌早期诊断及治疗的新生物分子。
卵巢癌是女性生殖系统中的三种主要恶性肿瘤之一。其死亡率在所有妇科肿瘤中最高。因为其起病隐匿，转移性强，预后极差，在过去几十年中，卵巢癌的5年生存率仅为28%-40%，如何更快更准的预防、诊断和治疗卵巢癌一直临床治疗亟待解决问题。microRNA是一类由内源基因编码的长度约为19-22个核苷酸的非编码单链小分子RNA，通过与靶基因RNA(mRNA)特异性碱基配对，miRNA引起靶mRNA的降解或抑制其翻译，从而调节各种细胞过程。越来越多的研究表明，miRNA表达异常在卵巢癌的发展中起着重要作用。
【研究目的】
miR-216b-5p在多种组织中已被证实是一种肿瘤抑制因子，而在卵巢癌中尚未报道。因此，本研究探讨了miR-216b-5p在卵巢癌中的表达和生物学功能，以期为卵巢癌发生的机制提供线索，为卵巢癌的诊断和治疗提供新的靶点。
【研究方法】
1.通过荧光探针原位杂交方法在卵巢癌组织芯片中检测miR-216b-5p的表达情况；
2.通过实时定量PCR检测正常卵巢上皮细胞与卵巢癌细胞中miR-216b-5p的相对表达量；
3.在卵巢癌细胞中过表达与下调miR-216b-5p，分别通过CCK8、流式细胞增殖实验、流式细胞凋亡实验、细胞划痕实验和transwell侵袭实验验证miR-216b-5p的生物学功能；
4.通过生物学信息学软件和查阅文献，预测miR-216b-5p的靶基因FOXM1及其结合位点；
5.通过免疫组化方法在卵巢癌组织芯片中检测FOXM1的表达情况，并分析FOXM1与miR-216b-5p的相关性；
6.通过实时定量PCR和Westernblot检测正常卵巢上皮细胞与卵巢癌细胞中FOXM1的表达水平；
7.通过双荧光素酶报告基因检测验证miR-216b-5p与靶基因FOXM1的结合；
8.在卵巢癌细胞中过表达与下调miR-216b-5p，通过实时定量PCR和Westernblot检测靶基因FOXM1的表达情况。
【研究结果】
1.miR-216b-5p在卵巢癌组织中的表达水平显著低于正常输卵管组织。根据FIGO分期，随着卵巢癌从早期进展至晚期，miR-216b-5p的表达量逐渐减少；
2.miR-216b-5p在卵巢癌细胞中的表达水平显著低于正常卵巢上皮细胞；
3.过表达miR-216b-5p能够显著抑制卵巢癌细胞的恶性增殖、迁移侵袭能力；
4.下调miR-216b-5p能够显著促进卵巢癌细胞的恶性增殖、迁移侵袭能力；
5.FOXM1在卵巢癌组织中的表达水平显著高于正常输卵管组织；
6.通过spearman相关系数分析显示，miR-216b-5p与FOXM1的表达水平呈负相关，且相关性具有统计学差异；
7.FOXM1在卵巢癌细胞中的表达水平显著高于正常卵巢上皮细胞；
8.双荧光素酶报告基因检测证实FOXM1mRNA的3′-UTR确实是miR-216b-5p的直接靶标；
9.在卵巢癌细胞中过表达miR-216b-5p可以降低FOXM1的表达水平；
10.在卵巢癌细胞中下调miR216-5p可以升高FOXM1的表达水平。
【结论】
miR-216b-5p能抑制卵巢癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力，miR-216b-5p可以与FOXM1靶向结合，在卵巢癌中调节FOXM1的表达。miR-216b-5p可能在卵巢癌中发挥着潜在的抑癌作用，有望成为卵巢癌早期诊断及治疗的新生物分子。