鲜壁虎冻干粉诱导肿瘤细胞凋亡和抑制血管新生的作用及其机制研究

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壁虎始载于《本草纲目》,是中国传统的中药材,临床实践发现壁虎有一定的抗肿瘤疗效,然而有关壁虎的药效成分及其抗肿瘤机制的研究未见报道.该课题在我们以往工作的基础上,采用中药血清药理学,研究了鲜壁虎冻干粉含药血清(serum preparation from mice orally administered Gekko freeze-dried powder,简称SMGP)对大鼠C6胶质瘤细胞凋亡的诱导作用及其分子机制.此外还观察了鲜壁虎冻干粉对小鼠移植性肿瘤(H22)肝癌的抑制作用,并从血管新生角度初步探讨了其作用机理.方法:采用MTT、光镜、电镜、DNA琼脂糖电泳、TUNEL及流式细胞仪观察在体外SMGP对C6胶质瘤细胞的增殖抑制及诱导凋亡的作用.应用免疫组化及RT-PCR技术,分析C6胶质瘤细胞经含药血清处理后的bcl-2、bax基因mRNA及其蛋白表达的变化.应用免疫组化等技术,在体内观察灌胃鲜壁虎冻干粉的小鼠H22肿瘤生长及其对肿瘤组织的VEGF、bFGF蛋白表达和微血管密度的影响.结论1.SMGP能够有效地抑制体外大鼠C6胶质瘤的增殖,并且呈剂量依赖性.2.SMGP 在体外可以诱导大鼠C6胶质瘤细胞的凋亡.3.病理状态下的含药血清抑制肿瘤细胞增殖的作用强于生理状态下的含药血清.4.SMGP能够明显上调大鼠C6胶质瘤细胞bax的mRNA及蛋白的表达,而bcl-2的mRNA及蛋白的表达无明显变化,说明上调大鼠C6胶质瘤细胞bax基因的表达,可能是其诱导C6胶质瘤细胞凋亡的分子机制.5.小鼠移植性肿瘤(H22)模型体内实验结果表明,鲜壁虎冻干粉可明显抑制体内肿瘤的生长,诱导肿瘤细胞凋亡并可降低肿瘤组织的VEGF、bFGF蛋白表达,使肿瘤组织微血管密度降低,抑制血管新生可能是鲜壁虎冻干粉抗肿瘤的另一途径.
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