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辛伐他汀(SVT)是一种羟甲基戊二酸单酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶抑制剂,通过抑制HMG-CoA还原酶和胆固醇在肝脏的生物合成而降低血浆胆固醇和三酰甘油水平。自20世纪80年代以来广泛应用于冠心病和血脂异常疾病,已经成为当前最主要的血脂调节制剂之一。但SVT水溶性较差并受到肠道及肝脏中的代谢酶细胞色素P4503A4(CYP3A4)的代谢和肠道外向转运载体蛋白P-糖蛋白(P-gp)外排作用,而使口服生物利用度较低(5％)。
固体分散体技术是将药物分散在无生理活性或易溶于水的载体中成为高度分散状态的固体分散物。固体分散体技术可作为水难溶性和易水解药物的载体,提高药物的溶出度,增加药物的口服生物利用度。近年来,随着高分子材料领域的飞速发展和新型水溶性载体材料的开发,固体分散体技术越来越受到药学研究者的瞩目。当前许多疗效确切的药物普遍存在水溶性差或首过效应明显,导致口服吸收和生物利用度等方面存在诸多问题,限制了临床应用,这给固体分散体技术带来了良好的应用开发前景。
本文针对SVT的性质和固体分散体的特点,制备了SVT固体分散体,对于提高其生物利用度,降低用药剂量,具有较大的临床意义。
本文首先建立了准确、灵敏、快速测定体外SVT含量的HPLC-UV法,及体内SVT含量的LC-MS法,并对方法进行了系统评价。SVT的体外含量测定采用Kromasil C18色谱柱,乙腈-0.01 mol/L磷酸二氢钠(75:25,pH=4.5)为流动相,检测波长为238 nm,流速为1mL/min,柱温为45℃。线性范围为1～200μg/mL(r=0.9999)。在此条件下,各载体对SVT的出峰无干扰,低、中、高的回收率在98.80％～99.65％之间。此方法用于处方筛选和体外药物溶出度等试验中SVT含量的测定。
Beagle犬血浆中SVT的测定采用Discovery C18分析柱,乙腈-0.1％甲酸水溶液(60:40)为流动相,流速0.4mL/min,柱温为40℃。以洛伐他汀(LVT)为内标,以固相萃取柱对血浆进行预处理,采用电喷雾离子化法采集正离子,单离子方式检测SVT m/z419和LVT m/z405,血浆中内源性物质不干扰样品测定。在0.5～160 ng/mL范围内线性关系良好(r=0.9998)。最低定量浓度为0.5 ng/mL。低、中、高回收率在92.22％～99.16％之间,批内和批间精密度小于7.61％,符合生物样品的测定要求。方法可用于Beagle犬血浆中SVT的含量测定和药动学研究。
测定了SVT在硬脂酸聚烃氧(40)酯(PS)、泊洛沙姆407(F127)、泊洛沙姆188(F68)、PVPK30、羟丙基甲基纤维素(HPMC)中的溶解度,在PS、F127不同浓度的水溶液中,SVT溶解度随着载体浓度增大而线性增大。
以PS、PEG3400、F127等载体,以溶剂-熔融法制备了SVT固体分散体,测定了其体外溶出度。分别采用差示扫描量热分析(DSC)、热台偏光显微镜(HSM)、X射线衍射(PXRD)鉴定药物在载体中的物相状态。
以PS为载体制备的SVT固体分散体在0.05％十二烷基硫酸钠(SLS)中的溶出曲线与原药粉末溶出曲线相比,溶出度显著增大,60min累积溶出百分率接近90％。PS/SVT比例对药物溶出无太大影响。且与SVT原药粉末相比,物理混合物及固体分散体的f2值均小于50,提示两者的溶出曲线与原药粉末均有显著性差异,表明固体分散体的溶出显著快于原药粉末；当以物理混合物为参比时,相应的固体分散体的f2值亦均低于50,表明两者的溶出也有显著性差异,固体分散体的溶出大大快于物理混合物。PS/SVT固体分散体的MDT值也由原药粉末的16.22降至10.72(比例为8:1)和7.34(比例为10:1),这亦表明固体分散体的溶出显著快于原药粉末。以PEG3400为载体制备的SVT固体分散体在0.05％SLS中的溶出曲线与原药粉末溶出曲线相比,溶出度显著增大,f2值均小于50。物理混合物对药物的溶出提高不大。至20min后药物溶出百分率不再提高。比例为10:1的PEG3400/SVT固体分散体60min累积溶出百分率为63.64％,为原药粉末的1.85倍。以F127为载体制备的固体分散体在0.05％SLS中的溶出缓慢,60min累积溶出率小于60％。溶出过程中,当胶囊内容物崩散接触水后,可见在细小颗粒的外面形成一层凝胶,对药物释放形成屏障作用,造成固体分散体溶出缓慢。
DSC、HSM、PXRD等结果显示所制备的固体分散体中药物均以无定型或分子状态存在,而在物理混合物中则以结晶形式存在。红外光谱的结果显示,药物与载体间无明显的相互作用。
Beagle犬口服SVT固体分散体的初步药动学试验结果,SVT固体分散体胶囊与市售片Zocor(R)的各药动学参数如下:Cmax:66.08±28.69,51.03±34.69 ng/mL；Tmax:1.00±0.51,2.11±0.92 h;AUC0-12h:165.08±60.26,151.44±86.20 ng*h/mL;AUC0-∞:172.37±62.06,166.73±79.81 ng*h/mL；MDT:2.78±0.65,3.74±1.09 h；Cmax/AUC0-∞:0.39±0.13,0.32±0.16 h-1。以市售片Zocor(R)(微粉化制剂)为对照,SVT固体分散体胶囊的AUC0-12h是对照组的1.1倍左右；Cmax约为对照组的1.3倍；Tmax较对照组提前约1小时左右。采用AUC归一化的Cmax值评价药物的吸收速度,固体分散体胶囊>Zocor(R)。
药动学参数的方差分析表明,两制剂组间Cmax、AUC0-12h和AUC0-∞无显著差异。从双单侧检验,90％置信区间检验的结果来看,SVT固体分散体的Cmax、AUC0-12h和AUC0-∞均高于Zocor(R)片剂。以市售Zocor(R)片剂为对照,SVT固体分散体胶囊的相对生物利用度为109.00％
综上所述,以PS为载体制备的固体分散体,可增加SVT的生物利用度。本文为SVT固体分散体的研制和体内、外评价等提供了参考。