论文部分内容阅读
目的:大豆及其制品是亚洲传统饮食的重要食品,其中含有丰富的异黄酮类植物雌激素。近来,植物雌激素因具有抗氧化、抗肿瘤等诸多保健作用而备受青睐,然而其对雄性生殖系统的不良影响也不容忽视。有关植物雌激素对阴茎勃起功能影响的研究极少,因此,本研究探讨异黄酮类植物雌激素对阴茎勃起功能的影响,为男性合理摄入豆类及其制品提供理论依据。
方法:本研究分两部分,动物实验及流行病学调查。动物实验部分:Ⅰ:选取成年(9-10周龄)雄性SD大鼠30只,均分为5组:正常对照组、低、中、高剂量大豆黄酮组及阳性对照组,每组5只,分别给予蒸馏水、2、20、100mg/kg大豆黄酮及O.1mg/kg己烯雌酚(DES)灌胃,1次/d,连续90d。与给药第O、30、60、90d自眼眶采血,行阿朴吗啡试验;测定血清睾酮(T)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E2)水平;90d后处死大鼠,取阴茎标本,Masson染色、维多利亚蓝染色观察阴茎海绵体结构改变,免疫组化染色检测海绵体内平滑肌肌动蛋白(α-actin)、Ⅰ胶原表达;RT-PCR、Western-blot分别检测海绵体雌激素受体(ER)α、βmRNA及蛋白的表达。Ⅱ:选取青春期(4-5周龄)雄性SD大鼠40只,分组及处理措施同Ⅰ。90d后行阿朴吗啡试验及电刺激阴茎海绵体后海绵体内压力(ICP)测定;心脏取血,测定血清T、LH、FSH、E2水平;取阴茎标本,鬼笔环肽-TRITC染色,激光共聚焦显微镜观察海绵体内胶原及平滑肌含量:免疫组化检测海绵体Erα、β及eNOS、nNOS表达情况;RT-PCR检测海绵体内RhoAmRNA表达。流行病学调查部分:对387例35岁以上男性回顾性调查阴茎勃起及食用豆类及其制品情况,数据进行非条件logistic回归分析。
结果:动物实验部分:Ⅰ:低剂量大豆黄酮组大鼠勃起次数及潜伏期与正常对照组无显著差异,而中剂量组大鼠给药60d后开始出现勃起次数减少、潜伏期延长,并持续到第90d,同时伴有血清睾酮、FSH及LH水平降低,高剂量组自给药30d后即出现类似变化,与阳性对照组类似。90d后,各剂量大豆黄酮组大鼠阴茎形态、重量与正常对照组无显著差异,而阳性对照组大鼠出现阴茎重量减轻、牵拉长度变短。Masson及维多利亚蓝染色显示,中、高剂量组阴茎海绵体平滑肌及弹力纤维成份明显减少而胶原增多(P均＜0.01),同时白膜下弹力纤维束断裂、变薄:免疫组化染色显示,中、高剂量组阴茎海绵体α-actin表达显著减少而Ⅰ胶原表达增多(P均＜0.01)；RT-PCR及Western-blot结果显示,中、高剂量组阴茎海绵体Erα mRNA及蛋白表达与正常对照组无显著差异(P均＞0.05),但ERβ mRNA及蛋白表达显著减少(P均＜0.01);阳性对照组大鼠也出现以上变化,但低剂量大豆黄酮组未出现上述改变。Ⅱ:青春期开始长期摄入大豆黄酮后,与正常对照组比较,中、高剂量组阿朴吗啡诱导的勃起次数显著减少、勃起潜伏期显著延长,同时ICP显著降低,并伴有睾酮水平降低(P＜0.05或0.01),阳性对照组大鼠上述改变更明显,低剂量组大鼠未出现上述改变。各剂量大豆黄酮组大鼠的阴茎形态与正常对照组无显著差异,阳性对照组则出现小阴茎；激光共聚焦观察显示,中、高剂量组阴茎海绵体平滑肌成份显著减少、胶原成份增多,而低剂量组则无显著改变。免疫组化及RT-PCR结果显示,中、高剂量及阳性对照组大鼠海绵体ERβ及eNOS表达较正常对照显著减少,同时,RhoA mRNA表达增多(P＜0.05或0.01),而ERα及nNOS无显著变化。流行病学调查显示:387例调查对象中,报告ED者197例(50.9％)；经常摄入大豆及其制品者178例(45.9％),其中报告ED者110例(61.80％),不经常摄入大豆及其制品者209例,其中报告ED者87例(41.62％);多因素分析结果表明,年龄、精神抑郁及异黄酮类植物雌激素为。ED的独立危险因素。其中,经常食用大豆及其制品OR值为3.46(95％CI:2.14,5.84)。
结论:无论在成年期还是青春期,长期摄入植物雌激素大豆黄酮不影响大鼠阴茎的生长,阴茎仍可发育到正常大小。然而,大豆黄酮随着剂量的增加(＞20mg/kg)及时间的延长,会导致阴茎勃起功能减弱,同时,阴茎海绵体组织结构也发生改变,表现为海绵体内平滑肌细胞减少、弹力纤维减少、白膜下弹力纤维束断裂、变薄,而胶原成份增多;长期摄入较高剂量的大豆黄酮后,阴茎海绵体ERβ及eNOS表达显著下调,RhoA mRNA表达显著增多,而ERα及nNOS无显著改变,这些变化可能是大豆黄酮导致阴茎勃起功能减弱的结构基础及分子机制。包含大豆及其制品在内的传统饮食仍然在我们的饮食结构中占有重要地位;经常食用大豆及其制品是ED的独立危险因素；经常食用大豆及其制品者患ED的风险是不经常食用者的3.46倍。