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目的：检测正常宫颈上皮、宫颈上皮内瘤变和宫颈鳞状细胞癌组织中ANXA1蛋白的表达和组织分布特征,探讨ANXA1蛋白在宫颈上皮癌变过程中的作用；进一步利用实时荧光定量PCR分析宫颈癌中ANXA1基因表达,探讨ANXA1在宫颈癌中表达异常的相关机制,为探索宫颈癌的防治新策略和新治疗靶点提供实验依据。
方法：1、234例组织蜡块样本包括轻度宫颈上皮内瘤变(CIN 1)30例、中度宫颈上皮内瘤变(CIN 2)27例、重度宫颈上皮内瘤变(CIN 3)32例、浸润性宫颈鳞状细胞癌(ISCC)93例和52例正常宫颈鳞状上皮组织,EnVisionTM plus免疫组织化学染色分析ANXA1蛋白的表达和组织分布特征；2、收集93例宫颈癌的临床病例资料,分析ANXA1蛋白表达与早期宫颈浸润癌预后相关因素的联系；3、同时对52例正常宫颈上皮组织和89例不同程度的宫颈上皮内瘤变组织进行Ki-67抗原EnVisionTM plus免疫染色,分析ANXA1蛋白表达异常与宫颈上皮内不典型增生细胞之间的关系；4、TapMan实时荧光定量PCR测定15例早期宫颈浸润性鳞状细胞癌和相应的癌旁正常宫颈上皮组织中ANXA1mRNA表达水平,同时应用免疫印迹(western blotting)和IHC分析宫颈组织ANXA1蛋白的表达。
结果：1、在正常宫颈上皮中ANXA1蛋白呈阳性高表达,可以作为阳性对照。而在正常宫颈上皮,宫颈上皮内瘤变和宫颈癌组织中.ANXA1蛋白表达具有显著性差异(P<0.01)。随着病变进展,ANXA1蛋白表达呈明显下降趋势；2、在正常宫颈上皮和CIN组织中Ki-67抗原表达与ANXA1蛋白表达呈负相关(P<0.01)。伴随CIN级别增加Ki-67抗原染色逐渐增强,ANXA1蛋白表达显著减少,其减少主要发生在宫颈上皮内不典型增生细胞；3、ANXA1蛋白在宫颈癌不同的临床分期、淋巴结状态、肿瘤细胞分化程度中表达有显著性差异(P<0.05)；4、宫颈浸润性鳞状细胞癌组织中ANXA1蛋白表达减少程度与肿瘤细胞组织分化程度密切相关(P<0.05),肿瘤细胞分化越低,ANXA1蛋白减少越明显；5、TapMan实时荧光定量PCR显示ANXA1基因表达在早期宫颈癌组织中明显低于其相应的正常组织(P<0.01)。
结论：发现ANXA1蛋白表达减少是宫颈癌变过程中的早期事件,检测ANXA1蛋白表达可以为宫颈上皮内瘤变的诊断提供帮助。ANXA1蛋白表达变化与宫颈鳞状细胞癌的临床病理相关因素密切相关,其表达下调可以作为预测早期宫颈鳞癌不良预后因素之一。通过本研究旨在阐明ANXA1蛋白表达对于维持宫颈上皮细胞的分化成熟、正常形态都发挥重要作用；ANXA1蛋白表达异常可以影响宫颈鳞状上皮细胞的分化成熟,参与宫颈癌的发生、发展过程。