【摘 要】
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研究根据3β,20α-HSD活性中心的一段已知氨基酸序列设计了一对反向简并引物,以不同限制性内切酶消化后自身环化的中国绵羊基因组DNA为模板进行PCR扩增,获得大小分别为400bp
【出 处】
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中国科学院发育生物学研究所 中国科学院遗传与发育生物学研究所
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研究根据3β,20α-HSD活性中心的一段已知氨基酸序列设计了一对反向简并引物,以不同限制性内切酶消化后自身环化的中国绵羊基因组DNA为模板进行PCR扩增,获得大小分别为400bp、700bp和1kb左右的三个片段,其中400bp片段产量最高,扩增重复性也最好.将它们分别回收克隆到pBluescript质粒的EcoR V位点.经序列分析和同源性比较发现400bp片段同目的基因最为接近.以该片段为基础再次设计引物反向扩增,产物经Southern杂交分析后对其中的1.1kb片段克隆并作序列分析.测定结果表明其中有部分序列与探针同源.与NCBI基因序列库的联网比较结果显示该片段极可能是目的基因的一部分.
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