节杆菌(Arthrobacter sp.DM6)对偶氮染料的降解和偶氮还原酶性质研究

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节杆菌(Arthrobcter sp.DM6)对偶氮梁料酸性大红GR具有良好的降解和脱色作用.该文研究了节杆菌DM6完整细胞对偶氮染料酸性大红GR的降解作用,并从菌体中提取并纯化了降解酸性大红GR的关键酶-偶氮还原酶,同时研究了偶氮还原酶的一些性质.通过硫酸铵分部沉淀、DEAE-cellulose DE-22离子交换柱层析和Sephadex G-75凝胶过滤等三步纯化,得到了聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)纯的偶氮还原酶.该酶为单亚基,分子量为37,000.酶促反应的最适温度为35℃,最适作用的pH为7.0,且作用的pH较宽.该酶明显受Mg<2+>、C a<2+>和Mn<2+>的激活、但受Co<2+>和Fe<3+>的抑制.该酶的热稳定性较好,80℃水浴处理30min后仍具有50%酶活力.酶活性受氧的严格抑制,但这种抑制作用是可逆的.通过对降解产物吸收光谱扫描和亚硝酸钠反应的鉴定,表明该酶在除氧和外加还原力(NADPH或NADH)的条件下可将偶氮双键(-N=N-)还原断裂,形成芳香伯胺类化合物.
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