【摘 要】
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目的：1、探讨一种高效的获取高纯度神经干细胞(NSCs)方法，观察其能否继续保持增殖和分化的能力继而为之后NSCs移植修复脊髓损伤提供充足的细胞来源。2、探讨电针能否加强GDNF基
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目的：1、探讨一种高效的获取高纯度神经干细胞(NSCs)方法，观察其能否继续保持增殖和分化的能力继而为之后NSCs移植修复脊髓损伤提供充足的细胞来源。2、探讨电针能否加强GDNF基因修饰的NSCs移植对脊髓损伤后降低细胞凋亡蛋白的启动，改善大鼠的运动功能。 方法：1、从12-15天孕期的母鼠子宫里取出胎鼠，用胎鼠的脑组织进行体外分离、培养神经干细胞。2、用载有GDNF基因和GFP标签的慢病毒在体外感染神经干细胞，在荧光倒置显微镜下观察细胞的感染效果和生存状态。3、65只成年雌性SD大鼠，通过手术造成T11节段不完全横断损伤模型，并于造模后第2天局部移植GDNF修饰的NSCs，同时给大鼠做电针治疗。通过BBB评分系统来统计大鼠造模后双下肢活动的恢复程度；在不同的时间节点取材，通过免疫组织化学染色，观察相关细胞凋亡因子表达，并以此来评价治疗该法治疗脊髓损伤的效果。 结果：1、通过该法体外分离、培养而来的原代神经干细胞具有增殖和分化的能力，但在经过传代3-4代培养后细胞活性及分化能力减弱。2、实验动物双后肢活动BBB得分电针干预组与单纯细胞移植组无统计学差异，各治疗组与对照组均有统计学差异。在取材的病理切片中观察到caspase-8电针干预组与单纯细胞移植组有统计学差异，各治疗组与对照组均有统计学差异。 结论：1、体外分离增殖的原代神经干细胞在传代2-3代内依旧可存有增殖活性和分化能力。2、电针干预GDNF基因修饰神经干细胞移植与单纯的细胞移植相比可降低局部细胞凋亡因子的表达，增加轴突数量的恢复，保护脊髓应有的功能，但在大鼠双后肢活动能力的改善方面没有显著效果。
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