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目的：建立高效液相色谱-串联质谱（LC-MS／MS）法同时定量分析血浆、不同组织及尿液中朝藿定A、B、C以及淫羊藿苷的方法；从体内动力学、组织分布和尿排泄多层次研究朝藿定A、B、C以及淫羊藿苷的体内过程,为阐述淫羊藿黄酮体内效应物质提供实验依据。方法：实验采用甲醇蛋白沉淀法提取血浆和组织匀浆中的朝藿定A、B、C以及淫羊藿苷,以染料木素为内标,色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18柱（2.1×150 mm,5μm）；采用电喷雾离子化（ESI）源,多反应离子监测（MRM）方式负离子检测朝藿定A、B、C以及淫羊藿苷,流动相：乙腈-0.1%乙酸水（32：68）；流速：0.3 mL·min-1；柱温：40℃。单次灌胃大鼠淫羊藿提取物水溶液（0.069 g·mL-1）后,测定给药后血浆和组织样品中朝藿定A、B、C以及淫羊藿苷的浓度,绘制药-时曲线,计算主要药动学参数,分析其在大鼠体内的分布规律。应用LC-MS/MS法建立大鼠尿液中朝藿定A、B、C以及淫羊藿苷的同时测定方法,以人参皂苷Rg1为内标,选用Agi lent EclipseXDB-C18色谱柱（2.1×150 mm,5 μm）；流动相：乙腈-0.1%乙酸水（30：70）；流速：0.3 mL.min-1;柱温：40℃；采用电喷雾离子源（ESI）负离子多反应检测（MRM）模式测定。采用单次灌胃大鼠淫羊藿提取物水溶液的方式,测定给药后尿液中朝藿定A、B、C以及淫羊藿苷的浓度,计算主要尿排泄动力学参数,分析排泄规律。结果：血浆样品中,朝藿定A、B、C以及淫羊藿苷在1-500 ng·mL-1浓度范围内线性关系良好,日内精密度RSD<8.7%,间精密度RSD<14.6%；血浆中4种淫羊藿黄酮的AUC0-t分别为25.641±17.162 ug／L.h, 24.957±15.765 ug／L.h,262.261±174.458ug/L·h和44.859±26.827 ug／L·h,Tmax.分别为0.625±0.306 h,0.625±0.306 h.0.625±0.306 h和0.583±0.382 h,t1/2分别为1.308±0.561 h,1.700±1.172 h,1.535±0.793 h和1.361±0.766 h,。在组织样品中,朝藿定A、B、C以及淫羊藿苷在1-500ng·mL-1浓度范围内线性关系良好,日内精密度RSD<8.4%,日间精密度RSD<14.9%；结果表明朝藿定A、B、C以及淫羊藿苷能在0.25-1 h内迅速分布于各主要组织,各组织中浓度于2 h开始减少,至6 h各组织中的淫羊藿黄酮基本消除。在尿液样品中,朝藿定A、B、C以及淫羊藿苷在1-500 ng·mL-1浓度范围内线性关系良好,日内精密度RSD均<7.4%,日间精密度RSD均<12.7%。大鼠口服灌胃给予淫羊藿提取物36 h后朝藿定A、B、C及淫羊藿苷的平均尿累积排泄量/给药量比值不超过0.266‰,0.198‰,0.297‰和0.425‰。结论：本研究所建立的LC-MS／MS方法快速、准确、可靠,适用于血浆和组织样品中朝藿定A、B、C以及淫羊藿苷的同时测定,血浆中4种淫羊藿黄酮峰浓度Cmax与相应AUC0-t均不大,说明口服后吸收程度较低,Tmax和t1/2表明淫羊藿黄酮的吸收和消除均较快。从组织分布情况来看,朝藿定A、B、C以及淫羊藿苷这4种黄酮成分,主要分布在大鼠肝、肺和雌性生殖器官中,提示这些器官可能是淫羊藿黄酮的靶器官。建立的适用于同时测定尿液中朝藿定A、B、C以及淫羊藿苷的LC-MS/MS方法简便灵敏快速,能够应用于淫羊藿提取物尿排泄动力学研究,其结果显示淫羊藿提取物原形药物基本不经尿液排泄,提示肾排泄可能不是其主要消除途径,淫羊藿黄酮在体内主要经代谢消除。