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第一部分 HA117对神经母细胞瘤BE(2)-C细胞干性相关生物学行为的影响及机制初探 目的：研究 HA117 对神经母细胞瘤（neuroblastoma;NB）细胞系BE(2)-C的干性相关生物学行为的影响;并对其机制进行初步探讨。 方法：采用阴性对照和HA117干扰慢病毒转染BE(2)-C细胞构建阴性对照组和HA117干扰组;qRT-PCR法检测HA117在2组细胞中的表达;验证转染的效率;采用CCK-8法检测2组细胞的增殖、流式细胞学检测细胞周期;MTT法检测药物敏感性;划痕实验检测细胞迁移能力;transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力;成球实验检测2组细胞自我更新能力、qRT-PCR 法检测 HA117 在贴壁生长及成球的BE(2)-C、2组细胞中的HA117及Nestin的表达;裸鼠成瘤实验检测2组细胞肿瘤形成能力;qRT-PCR 及 Western Blot 法检测 2 组细胞中Nestin、RARα 、RARβ 、RARγ 及RET的表达。 结果：qRT-PCR检测结果显示;HA117干扰组HA117 RNA表达明显低于阴性对照组（P<0.05）;CCK-8 法检测显示从第 3 天开始HA117干扰组的OD值明显低于阴性对照组（P<0.05）;流式细胞仪细胞周期检测结果示HA117干扰组G0/G1期细胞百分比（83.20±1.84%）高于阴性对照组（63.32±6.40%）;2 组细胞 S 期细胞百分比差异与G0/G1期相反（P<0.05）;MTT法检测HA117干扰组的药物敏感性较阴性对照组明显增加（P<0.05）;划痕实验和 transwell 侵袭实验检测结果显示 HA117 干扰组的迁徙和侵袭能力均较阴性对照组降低（P<0.05）;成球实验结果显示成球的BE(2)-C的HA117 RNA和Nestin mRNA较贴壁生长的BE(2)-C细胞降高、HA117干扰组的成球体积及成球率均较对照组低;裸鼠成瘤实验结果显示HA117干扰组的肿瘤生长速度及体积均较对照组低（P<0.05）;qRT-PCR及Western Blot法检测HA117干扰组的干性标志物Nestin表达较对照组降低（P<0.05）; HA117干扰组RARα 、RET mRNA及蛋白表达均较对照组明显升高（P<0.05）;而RARβ 、RARγ mRNA及蛋白表达量在两组间无显著差异（P>0.05）。 结论： HA117的表达下调可抑制 NB细胞 BE(2)-C 的增殖、迁移、侵袭、自我更新及成瘤能力等干性相关生物学行为;下调 NB干性标志物 Nestin;其可能的潜在机制是通过上调 RARα 及 RET 的表达而抑制BE(2)-C细胞的干性。HA117的表达与NB的恶性生物学行为相关;提示其可能为NB的诊治提供一个新的生物靶点。 第二部分 HA117通过下调DPF3的表达抑制神经母细胞瘤的分化 目的：探讨HA117及DPF3在儿童神经母细胞瘤（NB）中的表达及意义;以及其对NB分化的影响和可能机制。 方法：运用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）、免疫组化法检测HA117、DPF3在35例NB、8例节细胞神经母细胞瘤（GNB）和10例神经节细胞瘤（GN）中的表达水平。构建HA117过表达和空载慢病毒;分别转染SH-SY5Y细胞株;构建HA117过表达组和对照组。采用qRT-PCR和Western Blot检测HA117和DPF3的RNA和蛋白质表达水平。采用10 μM维甲酸（RA）诱导HA117过表达组和对照组细胞;普通光学显微镜观察细胞形态;免疫荧光法检测神经特异性标志物MAP2蛋白质表达;Western Blot检测HA117过表达组和对照组细胞MAP2、NSE蛋白质的表达情况。 结果：HA117 的 RNA 在 NB 中的相对表达量为 30.14±15.96;明显高于GNB/GN的1.03±0.37（P＜0.05）;DPF3的mRNA在NB中的表达量为0.81±0.17;明显低于GNB/GN的3.14±1.09（P＜0.05）;与HA117的表达趋势相反。免疫组化检测发现DPF3在GNB/GN中呈强阳性表达;在分化中的NB中呈弱阳性表达;在未分化/分化差的NB中呈阴性表达。过表达HA117在mRNA和蛋白水平明显下调SH-SY5Y中DPF3的表达。经10μM RA诱导7 d后;对照组细胞生长明显减慢;细胞长出突起;发生神经元样分化;HA117过表达组SH-SY5Y的MAP2、NSE的表达水平明显低于对照组（P＜0.05）。 结论：HA117和DPF3的表达可能与NB的分化相关;HA117可能通过下调DPF3的表达抑制NB的分化。