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鸡球虫病是由艾美耳属球虫所引起的一种危害性极其严重的寄生原虫病,此病呈世界性分布,是鸡病中最主要的疾病之一。目前实际生产中,此病仍难防范,给养禽业造成巨大经济损失。防治中抗球虫药的使用使球虫逐渐产生耐药性,因而防治效果不佳,同时对环境的破坏问题日益突出,以及形成的药物残留对肉禽品质及人体健康都产生重要影响,因此,对鸡球虫疫苗的研究成为了兽医专家学者的研究热点。本研究旨在研究鸡免疫了鸡球虫弱毒四价活疫苗后的安全性、免疫应答及临床保护效果,综合评价该疫苗的免疫效果。
本论文的第一部分摸索了应用ELISA法检测鸡球虫弱毒四价活疫苗免疫抗体水平的最佳反应条件,结果得出:该可溶性球虫卵囊抗原的最佳包被浓度为32μg/mL、酶结合底物最佳稀释浓度为1:2400、血清最佳稀释浓度为1:80,且经试验证明该方法敏感性高、特异性强、稳定性好。
本论文第二部分将400羽鸡分为空白对照组、半量免疫组、常量免疫组和阳性对照组,每组100只。在4日龄时给鸡免疫接种球虫疫苗,17日龄对鸡攻虫,24日龄对各组鸡剖杀。试验期间半量免疫组和常量免疫组在临床观察,增重情况,剖检肠道病变积分,血便积分和存活率等方面与空白对照组鸡差异不显著(P<0.05),说明了免疫该疫苗对鸡是安全的。
经ELISA法检测,半量免疫组的鸡在一免、二免和三免后血清抗体的平均OD值为0.393,0.762和0.813;在常量免疫组中,三次免疫后的血清抗体平均OD值为0.406,0.807和0.904。两组数据都说明了鸡首免还没有建立起较高的抗体水平,经过第二次免疫后两个免疫组相比空白对照组均产生了较高的抗体水平,经第二次免疫加强后抗体水平进一步增强,且常量免疫组的抗体水平总体趋势优于半量免疫。细胞因子检测表明,半量和常量免疫组产生的细胞因子含量显著高于空白对照组相应细胞因子产生水平,说明了免疫该疫苗使鸡建立了良好的体液免疫和细胞免疫应答。
在试验期间,鸡经过两次免疫后攻虫,半量免疫组和常量免疫组的鸡比不免疫攻毒的鸡在平均的相对增重率高25.3％和29.3%;剖检肠道发现半量免疫组和常量免疫组鸡的肠道病变较轻微,其严重程度轻于不免疫攻毒组的鸡,其中常量免疫组鸡好于半量免疫组的鸡;两个免疫组的鸡血便情况不明显,而不免疫攻毒组鸡95%的粪便带血,对比差别明显。不免疫攻毒组鸡存活率仅为44%,而两个免疫组的鸡没有死亡。这些数据说明了免疫此鸡球虫弱毒四价活疫苗对鸡抗球虫病能起到很好的保护效果,0.5羽份免疫就可以起到较好的保护,而1羽份免疫效果更佳。