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目的:研究核因子-κB(NF-κB)抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)联合TNF-α对宫颈癌HeLa细胞生长及凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。
方法:应用MTT法检测不同浓度PDTC、TNF-α及两者联合应用对HeLa细胞生长抑制率的影响;采用光镜及DAPI荧光染色法观察细胞形态学变化及凋亡情况;Western blot法检测HeLa细胞A20和caspase-3蛋白的表达。
结果:PDTC(50,100μmol/L)或TNF-α(30,60,120mg/L)可明显抑制细胞的增殖;低浓度PDTC(25μmol/L)不影响细胞增殖,但与TNF-α联合应用与单用TNF-α比较,细胞增殖抑制率明显增加(P<0.01);光镜与DAPI染色结果显示,不同药物处理组的细胞均有细胞凋亡,且联合用药组细胞凋亡率增高(P<0.01); PDTC(50μmol/L)与TNF-α(60mg/L)联合用药与单用TNF-α(60mg/L)或PDTC(50μmol/L)比较,胞质A20蛋白表达无明显变化,但caspase-3蛋白的表达明显增加(P<0.05)。
结论:PDTC可增强TNF-α对宫颈癌HeLa细胞的毒性作用,其机制可能与PDTC抑制TNF-α诱导的核转录因子NF-κB的活性,最终上调凋亡蛋白caspase-3表达有关。