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溶菌酶(lysozyme LZ)是一种有效的抗菌剂，全称为1,4-β-N-溶菌酶，又称粘肽N．乙酰基胞壁质水解酶，广泛应用于食品工业、医疗行业和科学研究领域中。人溶菌酶(human lysozyme，简称HLZ)，分子量14.6kD，分布于人体多种组织与分泌物中。人溶菌酶在临床抗菌和抗肿瘤治疗上具有潜在的使用价值。但由于自然来源有限，利用基因工程技术从细菌或酵母工程菌生产人溶菌酶实现产业化，是解决其供需矛盾的有效途径，具有十分光明的市场前景。本实验采用的是基因工程菌巴氏毕赤酵母SMD1168发酵生产的基因工程重组人溶菌酶(recombinant human lysozyme，即rHLZ)。
本文研究双水相萃取结合疏水层析步骤分离纯化重组人溶菌酶(rHLZ)过程：重组巴氏毕赤酵母发酵匀浆液直接经由PEG4000/Na<,2>SO<,4>双水相体系萃取，富含重组人溶菌酶的上相样品经过疏水层析介质做进一步纯化。双水相萃取重组人溶菌酶极易分配到上相。高效疏水层析将重组人溶菌酶(rHLZ)从聚合物中分离同时回收聚乙二醇(PEG4000)。双水相萃取结果上相回收率达98.8％，纯化因子18.0，浓缩因子3．6。疏水层析进一步纯化重组人溶菌酶(rHLZ)结果产率为88.4，纯化因子22.7，而加入到体系中的聚乙二醇PEG4000，大约95％被回收。本文还考察切向流过滤方法初步浓缩纯化人溶菌酶的途径，以便以后重组菌分泌蛋白的分离纯化研究。