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目的:对苦玄参Picriafel-tarraeLour的原植物形态及其茎、叶、花进行生药学研究,并对苦玄参不同药用部位(根、茎、叶)进行含量测定及抑菌抗炎实验,为进一步的应用研究提供科学依据。
方法:采用生药学鉴别手段来观察药材性状、显微特征及进行理化鉴别;以苦玄参ⅠA为指标,采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)对其进行含量测定;采用固体培养基连续稀释法测定苦玄参不同部位水提液及60%乙醇提液最低抑菌浓度(MIC);采用小白鼠二甲苯耳廓肿胀法、抑制小白鼠腹腔毛细血管通透性实验法和小白鼠鸡蛋清足跖肿胀法,观察苦玄参叶60%乙醇提取物(Picriafel-tarrae60%EthanolicExtracts,简称PFEE)对小白鼠的抗炎作用,给药7d后,测定小白鼠耳朵肿胀率、染料渗出量、足跖肿胀率。
结果:①显微鉴别:老茎横切面维管束连接成环,嫩茎维管束则各自独立;老茎髓部细胞中含有草酸钙方晶,嫩茎则无;叶中脉薄壁细胞含方晶;花粉粒呈类球形或类圆形,具3个萌发孔,表面具有点状纹理;柱头表皮细胞分化成柱状;以上特征有鉴别意义。
②理化鉴别:化学定性反应分析结果显示,苦玄参茎、叶、花都含有三萜皂苷的化学反应特征,在根、茎、叶、花冷浸液与回流液的光谱扫描图与TLC鉴别均表明:根、茎、叶、花的水、无水乙醇、氯仿、石油醚(60~90℃)提取物的吸收峰有部分相似;茎、叶、花乙酸乙酯:甲醇(5∶1)提取溶液色谱与苦玄参苷ⅠA对照品溶液色谱在相应位置上显一个相同的紫色斑点。提示茎、叶、花中均含有苦玄参苷ⅠA。
③含量测定:本法以C18柱进行分析,流动相为乙腈-0.5%醋酸(36∶64),流速1ml·min-1,检测波长264nm。实验结果显示苦玄参苷ⅠA在0.0242~0.1694μg/ul范围内线性良好,广西龙州县苦玄参药材中苦玄参苷ⅠA在根、茎、叶、花中的平均含量分别为0%、0.11%、1.63%、1.12%。
④体外抑菌实验:苦玄参不同部位的水提液和醇提物对实验用的菌株均有不同程度的抑制作用,其中对金黄色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌耐药株、表皮葡萄球菌、乙型溶血性链球菌抑制作用较强。苦玄参不同部位的60%乙醇提取物的抑制作用均优于水提液。
⑤抗炎药理作用研究:苦玄参叶60%乙醇提取物对冰醋酸引起小白鼠腹部毛细血管通透性增加、二甲苯所致的小白鼠耳肿胀、小白鼠蛋清足跖肿胀均具有抑制作用。
结论:对苦玄参进行较系统的生药学研究,其性状、显微及理化特征可作为鉴别真伪的参考依据;RP-HPLC测定方法简便、快速,重复性好。苦玄参叶中所测苦玄参苷ⅠA含量最高,苦玄参根中苦玄参苷ⅠA含量最低;抑菌实验表明苦玄参不同部位的60%乙醇提取物的抑菌作用均优于水提液;药理实验提示苦玄参叶对炎症动物可以抑制急性炎症早期的渗出、肿胀的形成。