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本论文以马钱子(Strychnosnux-vomicaL.)中的主要镇痛成分马钱子碱(brucine)为研究对象,以脂质体为囊材,采用乙醇滴入法制备纳米马钱子碱脂质体,建立了脂质体中马钱子碱包封率的测定方法。在此基础上,重点从理化性质、安全性和抗炎镇痛效应等方面将所制备的纳米马钱子碱脂质体与薄膜超声法所制备的纳米马钱子碱脂质体(为本研究小组前期制备,粒径和包封率分别为150nm和64.58%)进行比较研究,以确认何种方法所制备的纳米马钱子碱脂质体更为优异。得出的主要结论如下:
1.建立了凝胶柱分离-紫外光比色法测定纳米马钱子碱脂质体包封率的方法:进样量为0.5ml,检测波长为263nm。
2.采用乙醇滴入法制备纳米马钱子碱脂质体的最佳制备条件是:乙醇:水=1:10(vol:vol);Tween-80:总脂材=1:4(w:w);药物浓度为1mg/ml;冻干保护剂甘露醇的加入量为65%。在此条件下可得到平均粒经为45nm,分散均匀,平均包封率为72.11%,稳定性较好的纳米马钱子碱脂质体。
3.对薄膜超声法和乙醇滴入法所制备的纳米马钱子碱脂质体,分别从理化性质、药物安全性和药效学等几方面进行了比较研究。
3.1理化性质比较的结果显示:乙醇滴入法和薄膜超声法所制备的纳米马钱子碱脂质体均达到纳米级,二者的粒径分别为45nm和150nm,包封率分别为72.11%和64.58%,10h累积释放率分别为68.93%和92.63%,均具有良好的悬浮稳定性。因此,与薄膜超声法纳米马钱子碱脂质体相比,乙醇滴入法的纳米粒子粒径更小、包封率更高、缓释性更好。
3.2药物安全性比较的结果显示:薄膜超声法纳米马钱子碱脂质体对实验动物皮肤有轻微的急性毒性和致敏性,而乙醇滴入法纳米马钱子碱脂质体则未出现皮肤毒性。同时,乙醇滴入法所制备的LD50(165.8mg/kg)要大于薄膜超声法所制备的(136.5mg/kg)。说明乙醇滴入法纳米马钱子碱脂质体的毒性更小。
3.3药效学比较的结果显示:乙醇滴入法与薄膜超声法制备的纳米马钱子碱脂质体相比,在1.5mg/kg~6mg/kg剂量范围内,二者虽然都有镇痛抗炎的作用,且起效时间无显著差异,但前者的镇痛抗炎效果更好,且与剂量呈现正相关,作用持续的时间也更长。
因此,乙醇滴入法所制备的纳米马钱子碱脂质体比薄膜超声法所制备的纳米马钱子碱脂质体更为优越。
本项目的研究结果表明纳米脂质体是降低马钱子碱毒性,同时提高其疗效的有效途径;对解决马钱子和马钱子成分所存在的问题带来了可能,同时也为今后研发马钱子碱镇痛新剂型打下基础。