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目的:本研究通过建立高脂血症大鼠模型,以回肠Na+/胆汁酸转运体(iled bile acid transporter,IBAT)为研究对象,探讨回肠Na+/胆汁酸转运体与胆汁酸代谢及高脂血症形成的相关性,为防治高脂血症提供新的依据和分子理论基础,有望为治疗胆汁酸代谢紊乱及相关性疾病提供一种新的思路。方法:取SD大鼠(清洁级、雄性、体重145±8.5g)60只,随机分为2组,每组30只:普通饮食对照组(简称对照组)、高脂饮食实验组(简称实验组)。对照组予以普通饮食,实验组予以高脂饮食(配方为:在基础饲料中加入质量分数为0.04胆固醇、0.1猪油、0.05蔗糖、0.005胆酸钠、0.002丙基硫氧嘧啶),喂食90天,建立高脂血症模型,定期取血用自动生化仪检测胆固醇含量,4—6周监测血胆固醇水平,观察建模是否达到要求。两组入选大鼠均需排除已饮用含其它类药物饮食,高脂血症、糖尿病、畸形等疾病存在。建模成功后,所用实验方法分为以下两个环节:1.提取对照组和实验组回肠末端肠组织及结肠组织的RNA,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-polymerase chain reaction:RT—PCR)技术检测两组模型肠组织的IBAT基因表达的强度；2.提取对照组和实验组回肠末端肠组织及结肠组织,石蜡切片后用间接免疫荧光染色方法(Indirectimmuneeofluorescence staining)检测两组模型肠组织的IBAT表达的强度。统计数据运用SPSS14.0 for windows统计软件包作统计学处理,P<0.05显示有统计学意义。结果:1.电泳结果显示:实验中回肠末端扩增产物都出现了内参β—actin基因的220bp扩增带和IBAT基因的355bp扩增带,实验组IBAT基因扩增带亮度明显强于对照组。结肠中未见IBAT基因扩增带。半定量结果分析:利用QuantityOne软件计算比较每一泳道中PCR产物条带的光密度值,计算IBAT基因与β—actin条带的光密度的相对比值,通过比较各样本IBAT基因的相对值,最终得出IBAT基因在回肠末端组织中mRNA表达的相对含量。半定量结果的相对光密度值需每组每一实验对象同等处理条件下均重复测定3次,取其最终平均值作为统计用数据。最后结果显示:实验组大鼠IBAT基因mRNA表达较高(1.1538±0.0420),对照组大鼠IBAT基因mRNA表达则较低(0.9075±0.0606),表达差异性显著,有统计学意义(t=-11.062 P<0.05)。2.间接免疫荧光染色方法结果显示:在高倍荧光显微镜镜下回肠末端组织中出现黄绿色染色颗粒为阳性细胞。每张切片随机选取5个视野,每个视野内观察100个细胞,阳性细胞≥20％为阳性,否则为阴性。利用四格表的Fisher确切概率法检验结果显示:实验组IBAT表达阳性率为80％(24/30),对照组IBAT表达阳性率为13.3％(2/15)。它们之间的差异有显著性,有统计学意义(X2=9.932 P<0.05)。结论:1.实验组大鼠的IBAT基因mRNA的表达较对照组明显增加。2.实验组和对照组大鼠结肠中未见IBAT基因的表达。3.实验组回肠末端IBAT的表达明显高于对照组,故回肠中胆汁酸的主动转运过程增强,胆汁酸摄取率增加,引起胆固醇及脂类吸收的增加,加速高脂血症的形成。