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电化学DNA传感器是一门新兴的,涉及生物化学、电化学、医学及电子学等领域的交叉学科,利用DNA分子间的特异性互补配对规律发展起来的各种DNA生物传感技术,它提供了一种全新的基因检测技术,具有简单、可靠、价廉、灵敏和选择性好等优点,并且与目前的DNA生物芯片技术兼容,在分子生物学和生物医学工程领域具有很大的实际意义和应用价值。DNA电化学传感器携带方便、操作简单,可以将分子水平的DNA检测转换成可以识别的电信号。因此,在疾病基因诊断、药物筛选等方面具有广阔的应用前景。
本论文利用层层自组装法,将多壁碳纳米管(MWNTs)和金纳米粒子(GNPs)标记的DNA固定在金电极表面,结合不同类型的杂交指示剂构成电化学DNA传感器。在DNA探针的固定过程中,探讨了多壁碳纳米管(MWNTs)自组装时间。
利用制成的电化学DNA传感器对溶液中标准浓度的互补DNA进行定性和定量检测。在对标准互补DNA溶液的杂交检测过程中,探讨了不同类型杂交指示剂的最佳浓度、富集时间、电化学扫描条件等及最低检测限度。结果表明:在含Na+浓度为0.15 mol/L的磷酸盐底液(pH7.4)中,阳离子型杂交指示剂亚甲基蓝(MB)的最佳扫描速度为50mV/s,最佳吸附时间为50min,最佳浓度为10-6mmol/L,检测限为3.81×10-9;在含Na+浓度为0.3 mol/L的磷酸盐底液(pH7.4)中,阴离子型杂交指示剂蒽醌-2-磺酸钠(AQMS)的最佳扫描速度为50mV/s,最佳吸附时间为8h,最佳浓度为1mmol/L检测限为3.82×10-11。