论文部分内容阅读
BMP-6所编码的蛋白质是一种骨形态发生蛋白(bone morphogenetic proteins, BMPs)。这种蛋白属于转化生长因子-β(transforming growth factorβ,TGF-β)超家族成员。该家族成员无论在体内(in vivo)还是在离体(in vitro)实验中都表现出具有调节成骨细胞和成软骨细胞的分化,诱导异位骨形成,促进骨折愈合,及控制哺乳动物骨骼不同形态特征形成的功能。随着研究的深入,研究者发现BMPs的生物学作用不仅限于骨的发育和形成,而且几乎涉及全身所有系统,包括心血管、胃肠、呼吸、泌尿生殖、体被及神经系统的胚胎发育、生长和分化。使这个基因在人类医学研究和动物繁殖育种研究工作中越来越受到重视。本实验旨在研究和阐述BMP-6基因在猪这个重要家畜中的结构、表达情况和其对母猪繁殖性状的影响。本实验首次克隆了猪的BMP-6基因全CDS序列,并利用生物信息学的方法对其结构功能域及分子进化进行分析。利用PCR-SSCP方法对其进行单核苷酸多态性分析,探讨不同基因型在种间的分布规律;采用Real time-PCR方法研究了其组织表达规律。主要研究结果如下:1.首次克隆了猪的BMP-6基因全CDS序列(Genebank NM001168001)。序列总长为1518bp,预计编码505个氨基酸残基。2.使用PCR-SSCP方法在BMP-6基因CDS上检测出2个多态位点,其中引物BMP-s206和BMP-a207所检测出的多态位点为同义突变。引物BMP-s215和BMP-R所检测出的突变为错义突变。3.野猪与北京黑猪、法系大白猪之间差异极显著(P<0.01),与长白猪差异显著(0.01<P<0.05)。民猪与北京黑猪、法系大白猪之间差异极显著(P<0.01),与长白猪差异不显著(P>0.05)。其他猪种间差异不显著(P>0.05)。4.将检测到的错意突变多态位点与产仔数与产活仔数这两项繁殖性状进行相关性分析后发现,各基因型对这两项繁殖性状有显著影响。其中AB型最高,平均为13.00头/胎,比最低的BB型平均多6.71头/胎,差异显著(P<0.01)。而对于产活仔数,AA型最高,平均10.81头/胎,比最低的BB型平均多3.69头/胎。差异显著(P<0.01)。5.使用染料法Real-time PCR方法对BMP-6基因在各组织中的表达情况进行了分析。BMP-6在各组织中均有表达,且表达量在小肠、肌肉和软骨中最高。