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绿僵菌是世界上最早用于生物防治的昆虫病原真菌,其寄主范围广,可在8个目30个科200余种害虫上寄生,广泛用于农林害虫的防治并获得成功。在众多的害虫当中,地下害虫也是绿僵菌防治的一个重要对象。但是绿僵菌在相对稳定的易于调控的环境中,防治害虫容易获得成功,而在大田中环境复杂且易变,绿僵菌是否存在变异,是否还能够保持较高的产孢量的相关研究较少。因此,研究绿僵菌在生态系中,尤其在土壤中的宿存情况,有利更好地利用这种重要的昆虫病原真菌持续、有效的控制有地下生活史的农林害虫。
1.在现有的培养基的配方的基础上筛选绿僵菌的选择性培养基,试验结果表明OMA+100ug/ml氨卞青霉素+100ug/m硫酸链霉素+0.8ug/ml多菌灵+200ug/ml多果定+5ug/ml.结晶紫+0.5ug/ml瑞毒霉为绿僵菌的最佳选择性培养基,可有效的从土壤中分离绿僵菌。
2.从尖峰岭采集的5个土样中共分离到36个绿僵菌菌株,并对分离菌株进行初步鉴定。
3.对菌株的菌落生长速率、分生孢子萌发率、分生孢子耐热性等生物学性状研究表明JF86C、JF883、JF813E、JF8424个菌株表现良好,由此获得了4个适于进一步田间试验的菌株。
4.对JF86C、JF883、JF813E、YF842、MA45个菌株进行发酵培养,首先是液体摇瓶发酵,后通过浅盘固体发酵培养,获得大量的孢子粉。
5.将发酵培养的JF86C、JF883、JF813E、JF842、MA45个菌株的孢子粉埋于土壤中,定期通过选择性培养基检测土壤中菌落情况,并对产孢量及毒力的稳定性进行研究,结果表JF86C、JF883具有较强的宿存能力、较高的产孢量及稳定的毒力水平,适于大田试验。