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目的:本实验在细胞水平和组织水平,研究芒果苷对过氧化氢诱导晶状体氧化损伤的保护作用,并与维生素C进行比较。
方法:实验采用体外培养人晶状体上皮细胞株HLB3细胞和Wistar-大鼠晶状体,随机分为1)正常对照组;2)100μmol/L过氧化氢氧化损伤组,3-5)为芒果苷组,其中芒果苷浓度分别为5μmol/L,12.5μmol/L,25μmol/L;6-8)组分别为5μmol/L,12.5μmol/L,25μmol/L芒果苷加100μmol/L过氧化氢组;9-11)组为维生素C组,浓度分别为50μmol/L,100μmol/L,200μmol/L;12-14)组分别为50μmol/L,100μmol/L,200μmol/L维生素C加100μmol/L过氧化氢组。用甲基噻唑基四唑(Methyl thiazolyltetrazolium)MTT法测定不同组细胞的吸光度值(A值),检测不同药物作用细胞的增殖与损伤情况;无菌操作摘取大鼠晶状体,培养于24孔板,加入不同组药物作用后观察晶状体混浊程度,并照相记录,直接观察不同药物对晶状体的作用;将各组药物作用后的鼠晶状体,匀浆后按照各说明书方法测定晶状体超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽(glutathion,GSH)的值,从三方面分析不同药物的抗氧化能力。
结果:MTT结果显示:12.5μmol/L,25μmol/L的芒果苷可以促进HLB3细胞的生长增殖;100μmol/L的过氧化氢可以导致HLB3细胞的氧化损伤(P<0.01);12.5μmol/L,25μmol/L的芒果苷及100μmol/L,200μmol/L的维生素C可保护100μmol/L过氧化氢对HLB3细胞的损伤;而5μmol/L的芒果苷,50μmol/L的维生素C则无此作用。100μmol/L过氧化氢可以在体外培养状态下诱发晶状体的混浊,5μmol/L芒果苷和50μmol/L维生素C加100μmol/L过氧化氢组的晶状体混浊明显,而12.5μmol/L,25μmol/L芒果苷加100μmol/L过氧化氢组,100μmol/L,200μmol/L维生素C组及加100μmol/L过氧化氧组的晶状体都基本保持透明状态,说明了12.5μmol/L,25μmol/L芒果苷、100μmol/L,200μmol/L维生素C具有抗氧化,抑制品状体混浊的作用,而5μmol/L芒果苷,50μmol/L维生素C没有此作用。晶状体氧化酶检测结果显示:与正常对照组比较,12.5μmol/L,25μmol/L芒果苷组和100μmol/L,200μmol/L维生素C组的SOD值和GSH值都有明显的增高,MDA值明显降低,有显著统计学差异(P<0.01);且12.5μmol/L,25μmol/L芒果苷组的值均高于(SOD值、GSH值)或低于(MDA值)200μmol/L维生素C组,且具有统计学意义(P<0.01);100μmol/L过氧化氢组与正常对照组相比SOD值和GSH值明显降低,MDA值明显增高(P<0.01),12.5μmol/L,25μmol/L芒果苷组和100μmol/L,200μmol/L维生素C组可以有效抵抗这些改变(P<0.01);5μmol/L芒果苷和50μmol/L维生素C加100μmol/L过氧化氢组的SOD值、MDA值和GSH值没有统计学意义(P>0.05)。
结论:低浓度的芒果苷可以促进晶状体上皮细胞生长;芒果苷和维生素C都可以对抗过氧化氢造成的氧化损伤,延缓白内障的形成,且芒果苷抗氧化能力强于维生素C,是有效地抗氧化剂。