肺瘤平膏对肿瘤相关树突状细胞表型及免疫功能的影响

来源 :陕西中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gnbsr
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
肺癌又称原发性支气管肺癌,是起源于支气管粘膜上皮的恶性肿瘤,是严重威胁人民生命和健康的恶性肿瘤之一。手术、放疗、化疗及靶向治疗是肿瘤的主要治疗手段,但副作用大,晚期肺癌治疗的有效率低。近年来,中医药治疗肺癌得到了大家的广泛认可,中药所含成分具有多样性,通过多渠道、多靶点综合治疗是中医药治疗肺癌的优势,中医药治疗肺癌不仅能够改善患者临床症状,增强患者的免疫力,提高生活质量,而且具有稳定病灶,延长生存期等特点。中医药治疗肺癌的机制可能与多靶点有关。树突状细胞是决定免疫系统中适应性免疫是否被激活的关键细胞,作为最主要的抗原呈递细胞(Antigen-presentingcells,APC),不仅发挥呈递抗原的作用,还可以为T细胞活化和分化提供多种必需信号,从而塑造免疫应答。肿瘤相关树突状细胞(Tumorassociateddendriticcells,TDCs)是在肿瘤微环境中,髓系树突状细胞的一系列亚型在肿瘤发生时最先迁移到肿瘤部位,识别肿瘤细胞而诱导的树突状细胞称为肿瘤相关树突状细胞,具有抑制免疫作用。我们前期的研究表明,肺瘤平膏可以通过上调DCs表面相关膜分子的表达,增加免疫突触的形成诱导其成熟,促使未成熟的DC向MDC分化,促进迁移,提高CD3+、CD4+T细胞的表达,抑制CD8+T细胞表达,提高CD4+/CD8+细胞比值等机制调节DCs抗原呈递功能发挥抗肿瘤作用。因此我们大胆的推测,中药肺瘤平膏可能通过改变TDCs相关表型,进一步抑制Treg细胞(Regulatorycells)的表达,从而激活Th1细胞和CTL应答,发挥抗肿瘤作用。
  研究目的
  通过观察中药肺瘤平膏对肿瘤相关树突状细胞表型及相关通路蛋白表达的影响,初步验证肺瘤平膏发挥抗肿瘤作用的机制可能是通过抑制PI3K/AkT/mTOR通路逆转TDCs表型,发挥抗肿瘤作用。
  研究方法
  1.通过小动物活体成像等技术观察中药肺瘤平膏对Lewis肺癌模型小鼠瘤体抑制作用及对小鼠体重的影响;
  2.通过流式细胞技术检测肿瘤相关树突状细胞、T细胞及Treg细胞表型CD11c+、CD40+、MHC-Ⅱ+、CD80+、CD86+、CD3+、CD4+、CD8+、CD25+、Foxp3+的表达,观察肺瘤平膏对肿瘤相关树突状细胞、T细胞及Treg细胞的调控作用;
  3.通过WesternBlot技术检测肿瘤组织中PI3K、AkT、p-AkT、mTOR、p-mTOR蛋白表达量,观察肺瘤平膏对PI3K/AkT/mTOR通路的影响。
  研究结果
  1.小动物活体成像结果显示肺瘤平膏对Lewis肺癌荷瘤小鼠在第21天时,较对照组相比,肺瘤平膏中剂量组显著降低了小鼠瘤体的p/sec/cm2/sr,有统计学意义。获取瘤体称重计算抑瘤率:与control组比较,FLP-M组瘤重明显减小(P<0.05),
  其余各组之间无明显差异,FLP-L组、FLP-M组、FLP-H组抑瘤率分别为:24.56%、32.27%、27.39%;说明肺瘤平膏中剂量组对小鼠瘤体的抑制效果最好。
  2.肺瘤平膏对Lewis肺癌荷瘤小鼠瘤体在第14天、21天时有明显的抑制作用,显著降低了小鼠瘤体的p/sec/cm2/sr,较对照组相比,差异具有统计学有意义(p<0.01)。第21天处死小鼠,获取瘤体称重进行计算抑瘤率,肺瘤平膏组、环磷酰胺组、肺瘤平膏联合环磷酰胺组抑瘤率分别为:30.86%、46.59%、51.04%;但肺瘤平膏组小鼠体重明显优于环磷酰胺组及模型对照组,且差异有统计学意义。
  3.肺瘤平膏可以提高肿瘤相关树突状细胞表面表型CD11c+、CD40+、MHC-Ⅱ+、CD80+、CD86+的表达,尤以CD80+提高最为显著,且与对照组相比差异具有统计学意义。
  4.肺瘤平膏组CD3+、CD4+T细胞表达增高,较对照组相比,差异均具有统计学意义;较对照组相比,肺瘤平膏组能显著减少小鼠脾脏中Treg细胞的表达,差异具有统计学意义(p<0.05).
  5.肺瘤平膏对PI3K、Akt蛋白表达有较显著的抑制作用,较对照组相比,差异具有统计学意义;药物干预组p-Akt表达较对照组降低,肺瘤平膏、环磷酰胺及其联合用药较对照组相比均有显著差异,各组p-mTOR表达较对照组相比无明显差异,而mTOR表达降低,肺瘤平膏及其联合环磷酰胺组较对照组具有显著差异,差异具有统计学意义。
  研究结论
  1.通过小动物活体成像、抑瘤率的计算得出肺瘤平膏对Lewis肺癌荷瘤小鼠瘤体有明显的抑制作用,中剂量效果最佳,同时可以改善小鼠体重;
  2.通过流式细胞术检测发现肺瘤平膏可以上调肿瘤相关树突状细胞表面表型的表达,提高CD3+、CD4+、CD8+T细胞的表达,同时降低Treg细胞的百分比;
  3.通过WesternBlot技术检测肺瘤平膏上调肿瘤相关树突状细胞表面表型的作用可能与调控PI3K/AkT/mTOR通路有关。
其他文献
目的:对1949年1月1日至2018年12月31日间的慢性乙型肝炎中医诊疗相关文献和科研成果进行整理归纳,梳理慢性乙型肝炎的中医诊疗理论发展历程,搭建慢性乙型肝炎诊疗理论框架,提炼慢性乙型肝炎中医诊疗的新理论及新观点。  方法:检索慢性乙型肝炎相关文献、论著,按照相关标准进行筛选,对合格文献进行研读。文献检索时间范围为1949年1月1日至2018年12月31日,检索数据库以中国知网为主,万方、维普
目的:观察通浊降脂汤对高脂血症小鼠的基本生理情况及对生化指标的影响,验证“通浊降脂汤”的有效性;并与传统健脾化痰的治法进行比较分析,以期证明“通浊降脂”理论的可行性;研究高脂血症与PCSK9、LDL-R蛋白表达间的关系,以及通浊降脂汤对肝脏细胞中PCSK9、LDL-R蛋白表达的影响,以探究“通浊降脂汤”的作用靶点及起效机制。  方法:采用高脂奶粉代替饮用水的方法造模28天后开始药物干预;药物分别选
学位
目的:通过研究泻心汤对2型糖尿病大鼠的血糖、血脂、胰岛素、炎症因子及胰腺PI3K信号通路的干预作用,探讨泻心汤对胃肠湿热型T2DM大鼠的炎症因子与PI3K信号通路的影响,并对泻心汤干预该信号通路的机制进行研究。  方法:购买SPF级健康SD雄性大鼠72只,采用高糖高脂饲料进行喂养,经喂养8周后给予小剂量链脲佐菌素(STZ)(35mg/kg)腹腔注射,建立2糖尿病胰岛素抵抗模型。模型复制成功后,换用
学位
目的:目前高频电刀被广泛应用于各类肛肠手术之中,尤其是应用于混合痔痔核的剥离、切除及术野止血之中,对于简化手术程序、缩短手术时间、减少术中出血具有优势性,但同时也产生了一系列问题,电刀的不规范及过度使用现象时有发生。该研究的目的就是为了探讨高频电刀的使用对混合痔术后创面相关指标的影响,将高频电刀组与传统手术组进行比较分析,统计两组患者在术后疼痛、创面水肿、皮桥坏死率、痊愈时间、肛门功能等指标差异,
学位
目的:通过收集和整理中医药治疗白癜风医案文献资料,按照纳入排除标准规范化处理,并构建医案数据库,对医案中四诊、症状、证型、处方进行频数分析、聚类分析、因子分析、关联规则分析,以探求白癜风中医证治规律,从而对白癜风的临床辨治提供新提供一定的参考与借鉴。  方法:运用Excel表格录入医案中基本信息、四诊、症状、证型、处方的频数、频率,并运用SPSS21.0统计软件对录入的中药进行描述性分析、因子分析
学位
目的:了解目前孕妇痔病的诊疗现状。  方法:(1)通过问卷调查形式,调查146例西安市中医医院肛肠科就诊过的经产妇或孕妇患者、以及部分随机抽取的经产妇或孕妇并已经确诊为痔疮患者。本调查内容包括:是否在怀孕前患者是否患过痔病,或者有无肛内肿物脱出,便时出血(色鲜红)、肛门疼痛不适、肛门坠胀不适等痔病的主要症状;孕妇对痔病治疗的态度和治疗情况。通过综合统计分析以了解孕妇不同时期不同症状的发生情况以及治
学位
目的:观察中医辨证中药口服治疗在肛瘘术后创面恢复上的临床疗效。  方法:将符合纳入标准的83例低位单纯性肛瘘住院患者,随机分为治疗组和对照组,治疗组41例,对照组42例。治疗组根据患者的临床表现及四诊合参结果,中医辨证后,予中汤药口服治疗;对照组不论证型,均予康复新液口服;两组均干预14天。观察并记录两组患者术后未干预时及干预3、7、10天后的创面疼痛及创面分泌物情况;记录两组患者的原始创面面积以
目的:通过三仁汤制剂灌胃,观察其对功能性便秘大鼠肠道含水量的影响及对水通道蛋白3(AQP3)表达的影响,明确三仁汤对湿热下注型便秘大鼠结肠黏膜AQP3的调节作用,并探讨通调三焦法治疗功能性便秘的作用机理。  方法:将60只大鼠雌雄对半随机分为6组:空白对照组、模型组、阳性对照组、中药高、中、低剂量组。模型组、阳性对照组和给药组均以50mg/(100g·d)剂量的复方地芬诺酯水溶液2mL灌胃,每天灌
目的:通过比较固本抗纤丸与N-乙酰半胱氨酸治疗特发性肺纤维化(肺肾气虚热瘀津伤证)的有效性差异,客观评价固本抗纤丸和乙酰半胱氨酸泡腾片治疗特发性肺纤维化的临床疗效与实用价值,归纳总结两者的侧重点及固本抗纤丸的优势所在,为临床治疗本病提出安全、有效、实用的治疗方法并且提供新的思路和途径。  方法:采用随机、对照的实验方法进行临床实验研究,将符合标准的病例72例,随机分为对照组和治疗组,每组36人。对
目的:IgA肾病(IgAN)是一种常见的肾脏病,发病机制不明,西医治疗方案和效果各异。而中医方面,此类疾病有相当一部分表现为肾虚血瘀证的症状,我们以此为切入点,通过建立IgAN大鼠模型并使用不同的药物干预,观察大鼠的状态、生化指标和肾脏病理指标,比较各组药物治疗的治疗效果,探讨IgAN大鼠肾内小动脉病变的发生机制、益肾散结化瘀复方之肾复康Ⅱ号胶囊对IgAN大鼠肾功能的改善作用,以期为IgAN的防治
学位