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本文主要是关于极端嗜热菌Pyrococcus furiosus的蛋白Prefoldin的研究：(1)Pfu-PFD的克隆、表达和纯化。以Pyrococcus furiosus基因组DNA为模板，PCR分别扩增Pfu-PFDα亚基、Pfu-PFDβ亚基，克隆至质粒pT7473中，构建质粒pT7473-His-PFDα、pT7473-His-PFDβ，以此为基础，构建重组共表达质粒pT7473-His-PFD，转化到大肠杆菌BL21(DE)3中大量表达。超声破碎后离心取上清，根据其N末端的His-tag，镍亲和层析纯化一步即可得到纯度较高的目标蛋白。将纯化的PFDα亚基和PFDβ亚基按照浓度1∶2混合，80℃水浴加热30min，可得到成熟的重组蛋白PFD。经FPLC凝胶排阻色谱系统分析，PFDα亚基以单体的形式存在，PFDβ亚基以四聚体的形式存在。
(2)Pfu-PFD的功能和性质研究Prefoldin是一种和chaperonin协同作用的辅助伴侣，一般认为它能捕获蛋白折叠中间态，将其转运到Ⅱ型chaperonin，并与chaperonin一起使变性蛋白进行正确折叠复性。体外实验结果表明，Pfu-PFDβ亚基及成熟的Pfu-PFD具有对溶菌酶活性在高温下的保护作用，能防止溶菌酶在高温下的凝聚，有潜力作为一些酶在高温下的稳定剂。此外，当过量表达重组蛋白Pfu-PFDβ亚基或Pfu-PFD后，提高了大肠杆菌宿主自身在高温下的存活率以及耐热性能。