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为了从传统中药中寻找新的活性化合物和新的先导化合物,本文作者对四种中药蝉花(Cordyceps cicadae)、密花豆(Spatholobus suberectus)、牛大力(Millettiaspeciosa)、马尾千金草(Phlegmariurus fargesii)的化学成分进行了研究,并利用生物自显影技术对分离得到的部分化合物进行了初步乙酰胆碱酯酶抑制活性的测定。
1.虫草属真菌蝉花的化学成分研究
蝉花已经有1000多年的药用历史,是中国的珍贵药用真菌之一。由于蝉花的天然资源相当短缺,近些年陆续有学者对蝉花的人工培养进行了研究,结果表明蝉花的无性型蝉拟青霉在自然培养基或组合培养基上发酵佳,易于培养。为了探索人工培养的蝉花菌丝体与其他虫草属真菌在化学成分之间的差异,本文作者对蝉花的固体培养物进行了化学成分研究。最终从蝉花固体培养物中分离得到了29个化合物,发现8个新化合物,其中5个新的酚性糖甙,分别命名为3-methoxy-1,4-hydroquinone1-(4-O-methyi-β-glucopyranoside)(1),3-methoxy-1,4-hydroquinone4-(4-O-methyi-β-glucopyranoside)(2),vanillic acid4-(4-O-methyi-β-glucopyranoside)(3),5-methoxycinnamic acid3-O-(4-O-methyi)-β-glucopyranoside(4),naphthalene-1,8-diol1,8-bis(4-O-methyi-β-glucopyranoside)(5),这几个化合物共同特点在于葡萄糖的四位都发生了甲基化,在蝉花中4-甲氧基糖甙类化合物的首次发现证明了在蝉花体内也会观察到酚性化合物的4-甲氧基糖甙化;1个新的环戊酮类化合物,命名为3-methyl-2-(2-hydroxyl-3-carboxylpropyl)-2-cyclopenten-1-one(6),环戊酮类化合物为首次在虫草属真菌中发现;1个新的呋喃类化合物,命名为5-(2-hydrxoyethyl)-2-furanacetic acid(7);1个新的四氢吡喃类化合物,命名为3-hydroxyl-6-methyl-2-(2-hydroxylpropyl)tetrahydropyran(8),四氢吡喃类化合物也是首次在虫草属真菌中发现:另有18个化合物是首次在蝉花中发现。
2.密花豆化学成分的研究
密花豆为豆科密花豆属植物密花豆Spatholobus suberectus Dunn的干燥藤茎,是一味沿用了千年的活血化淤中药,其化学成分与药理作用一直是研究的热点。本文作者应用各种柱层析方法,从其水溶性部位中分离得到了17个化合物,其中3个新化合物30-32,为酚性糖甙,分别命名为5-O-(β-apiosyl-(1→2)-O-β-xylopyranosyl)-gentisic acid(30),1-O-(β-Apiosyl-(1→6)-O-β-glucopyranosyl)-3-O-methylphloroglucinol(31),15-O-(α-rhamnopyranosyl)aloe-emodin(32)。另外,从水溶性部位中分离得到的14个已知化合物主要是酚性糖甙、黄烷类化合物和蒽醌类化合物;除了化合物41(epicateclun)外,其他13个化合物为首次从密花豆中分离得到,并且是第一次从密花豆中分离得到芦荟大黄素碳甙类化合物。从密花豆的脂溶性部位中分离得到17个化合物,主要是黄酮类化合物、三萜类和甾体类化合物,其中10个为首次从该植物中分离得到,并且首次从密花豆中发现3-酮甾体类化合物。
3.牛大力化学成分的研究
牛大力作为民间药用鸡血藤的一个品种,具有补肺滋肾、舒筋活络的功效,主治肺虚咳嗽,咳血,肾膝酸痛,遗精,白带,风湿痹痛,跌打损伤。为了进一步研究不同来源的药用鸡血藤之间的化学成分差别,本文作者对牛大力的化学成分进行了研究,从中分离得到13个化合物,其中包括2个新的蒽醌类衍生物。新化合物73为芦荟大黄素的鼠李糖甙,和从密花豆中得到的蒽醌类新化合物为同一化合物,另外一个新化合物76为蒽醌聚合物的碳甙,两者分别命名为15-O-(α-rhamnopyranosyl) aloe-emodin(73)和10,10"-bis(β-D-glucopyranosyl)-1,8,1,8,1",8"-hexahydroxy-3,3,3"-tri(hydroxymethyl)[7,10,7,10"-trianthracene]-9,10,9,9"-tetraone(76)。另外有11个化合物为首次从牛大力中分离得到,并且首次从牛大力中发现葸醌和甾体类化合物。
4.马尾千金草化学成分研究
虽然前人对石杉科其他植物的化学成分以及药理作用研究较多,但是却很少有人对马尾杉属植物马尾千金草的化学成分和药理作用进行报道。因此为了进一步探索石杉科植物的化学成分组成,本文作者对石杉科马尾杉属植物马尾千金草的水溶性化学成分进行了初步研究,从中分离得到19个化合物,其中2个新化合物,一个是丙酮胺类衍生物,命名为Phlegmariurine P即3,4,5,6,7,8-hexahydro-5-imino-3,3,6,6,8,8-hexamethylpyrano[3,4-c]pyridin-1-one(77);另一个新化合物是lycopodine型石松生物碱,命名为6β-hydroxyl-5,15-oxidolycoponane(78);另外16个化合物为首次从马尾千金草中分离得到。在发现的已知化合物中,三丙酮胺的含量很大,可以达到0.8%,为首次从石杉科植物中分离得到丙酮胺类化合物。
5.乙酰胆碱酯酶抑制活性的测定
本文作者对Hostettmann报道的利用生物自显影技术测定乙酰胆碱酯酶抑制剂的方法进行了改进,并利用改进的方法对从蝉花、密花豆和牛大力中分离得到的部分新化合物以及从马尾千金草中分离得到的生物碱类化合物进行了乙酰胆碱酯酶抑制活性的测定。结果表明,化合物1(CC-1)、7(CC-7)、32(SS-3)、78(PF-2)和90(PF-14)显示了较强的抑制活性,化合物4(CC-4)、5(CC-5)、6(CC-6)、8(CC-8)和30(SS-1)显示弱的抑制活性,而化合物3(CC-3)、31(SS-2)、77(PF-1)、79(PF-3)、85(PF-9)、86(PF-10)、87(PF-11)、88(PF-12)、89(PF-13)、91(PF-15)、92(PF-16)、93(PF-17)、94(PF-18)和95(PF-19)没有显示抑制活性。另外,用石杉碱甲(Huperzine A)作对照,对化合物78(PF-2)和90(PF-14)在50、20、10、2和1μg五个浓度下的抑制活性进行了测定,结果显示化合物90(PF-14)的活性与Huperzine A的活性相近,而化合物78(PF-2)的活性与Huperzine A比较相对较弱。对活性较强的新化合物我们准备作进一步的活性测试。