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目的:检测RhoC、MMP-9在正常乳腺组织、乳腺纤维腺瘤组织、乳腺浸润性导管癌(IDC)组织中的表达及C-erbB-2、ER、PR在乳腺浸润性导管癌组织中的表达,分析RhoC、MMP-9在三种乳腺组织中表达的差异;RhoC、MMP-9与传统临床病理学参数及预后指标C-erbB-2、ER、PR之间的相关性:RhoC与MMP-9在IDC中的相关性;探讨RhoC、MMP-9与乳腺IDC转移的相关性以及将二者做为乳腺癌淋巴结转移的分子指标的可行性:探讨不同固定液对冰冻免疫组化结果的影响。
方法:选取两种固定液,应用冰冻免疫组织化学方法检测20例正常乳腺组织、20例乳腺纤维腺瘤组织、60例乳腺IDC中RhoC的表达;Envision两步法检测20例正常乳腺组织、20例乳腺纤维腺瘤组织、60例IDC组织中MMP-9的表达及60例乳腺IDC中ER、PR、C-erbB-2的表达。
结果:
(1)IDC中RhoC、MMP-9阳性率分别为76.7%(46/60)、70%(42/60),高于正常乳腺组30%(6/20)、35%(7/20)、及纤维腺瘤组35%(7/20)、35%(7/20),且差异有统计学意义,而RhoC、MMP-9在正常乳腺组和纤维腺瘤组阳性表达差异无统计学意义。
(2)RhoC、MMP-9在IDC中的表达与年龄无关;二者均随肿瘤最大径增大而增高,但RhoC在不同的肿瘤大小分组中的差异无统计学意义;MMP-9仅在≤2cm组和>5cm组中的差异有统计学意义;二者随组织学分级增高而增高,但仅在Ⅰ级和Ⅲ级之间的差异有统计学意义;与淋巴结转移密切相关;在不同激素受体表达组中不同,且差异有统计学意义。
(3)RhoC与MMP-9在IDC中的表达呈正相关。
(4)用99.5%的丙酮和90%的甲醇1:1混合液同定的HE切片和免疫组化切片组织结构清晰,连续,完整,免疫组化染色定位准确,非特异性着色明显改善,收到了较理想的效果。
结论:
1.RhoC、MMP-9在乳腺IDC中的表达高于其在正常乳腺组织、纤维腺瘤中的表达,且差异有统计学意义。
2.与传统的临床病理学参数的比较中,RhoC、MMP-9与组织学分级、淋巴结转移密切相关。
3.RhoC、MMP-9与ER、PR之间有显著负相关性。
4.RhoC、MMP-9呈显著正相关,RhoC能明显上调MMP-9的表达水平,提高肿瘤细胞的迁移能力的同时其降解胞外基质能力增强,从而导致肿瘤侵袭、转移能力的增强。
5.冰冻切片免疫组化固定液应选取99.5%的丙酮和90%的甲醇1:1混合液为宜。