【摘 要】
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近年来,恶性肿瘤已成为危害人类健康的最大杀手,抗肿瘤药物的研究和开发一直是药物研究领域的热点和重点.1971年,Folkman最早提出肿瘤生长是血管依赖性的,1982年第一个血管生
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近年来,恶性肿瘤已成为危害人类健康的最大杀手,抗肿瘤药物的研究和开发一直是药物研究领域的热点和重点.1971年,Folkman最早提出肿瘤生长是血管依赖性的,1982年第一个血管生成抑制剂被发现,1989年Ferrara等在牛垂体滤泡星状细胞体外培养液中首先纯化出具促内皮细胞分裂的糖蛋白-血管内皮生长因子(VEGF),它是一种有效的血管形成和血管通透性诱导因子.许多人类肿瘤中都检测到VEGF的存在,在肿瘤细胞培养上清中也检测到VEGF,说明VEGF在肿瘤中的分泌与肿瘤血管生成有密切关系.此后,针对VEGF抑制剂的研究成为抗肿瘤药物研究的新热点.VEGF单抗也是一种特异性的VEGF抑制剂,曾有多篇文献报道,鼠源VEGF单抗具有显著的体内、体外抗肿瘤活性,但由于鼠源单抗的人抗鼠抗体反应(HAMA反应),使鼠源单抗难以应用于临床,限制了单抗药物的开发和利用.通常采用基因工程技术将鼠源抗体进行人源化改造来解决这一问题.随着转基因技术的日趋成熟,直接制备带有人免疫球蛋白基因的转基因小鼠已成为现实.以转基因鼠为工具,采用常规的杂交瘤技术就能得到完全人源的单抗药物,应用于临床,这将产生巨大的经济效益和社会效益.该研究从荷瘤裸鼠肿瘤组织中获得人VEGF165基因,构建了pichia酵母表达载体,获得了纯化的有活性的VEGF165抗原,免疫五特征小鼠后首次筛选得到9株人源VEGF阳性杂交瘤细胞株,其中2株单抗具有显著的体内外抑瘤活性.利用转基因小鼠制备成功人源VEGF单抗在国内外均未见报道.
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