DNA旋转酶B′结构域的晶体结构解析与功能研究及Cul3-SPOP蛋白复合物的晶体学研究

来源 :中国科学院生物物理研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lovesyb
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本论文由三部分工作内容组成:   第一部分为DNA旋转酶B结构域的晶体结构解析与功能研究。   DNA旋转酶是原核生物细胞体系中不可缺少的,对细胞生存极为重要的蛋白分子功能聚集体。作为ⅡA类拓扑异构酶的一种,它能够催化一条双链DNA(G-segment)的断裂,使另一条双链DNA(T-segment)穿过这个断裂口,然后重新连接G-segment,从而完成了一轮改变DNA的超螺旋数的反应。经过了三十多年的研究,构成酶分子核心部位的GyrB’是DNA旋转酶的四个基本的功能单位中唯一没有三维结构报道的部分。GyrB’结构的解析对于DNA旋转酶全酶分子构造及其反应的核心机制的研究有重要意义。本文报道来源于结核分支杆菌,分辨率为2.8埃的GyrB’晶体结构。结构显示,GyrB显示出一个独特的蟹状二聚体的分子形貌。经过对已有的结构分析发现,犹如“钳子”的tail domain和组成蟹体的toprim domain可能分别结合双链DNA T-segment和G-segment;在反应过程中,传递T-segment的Tail-钳子可能在GyrBC端的43残基的肽段调节下发生构象变化,产生“开”与“合”两种状态,以适应功能反应的结构需求。在此基础上,我们构建了DNA旋转酶反应初始状态的全酶结构,提出了T-segment通过GyrB’“导航”传递实现与G-segment交叉产生DNA超螺旋的可能结构机理。对了解这一复杂的酶反应机制建立了新的结构基础,提供了新的认识。   本论文的第二部分为泛素连接酶Cu13-SPOP蛋白复合物的表达,纯化,结晶及数据处理的过程。Cu13-SPOP属于依赖于泛素的降解途径中泛素连接酶E3最主要的RING family的重要成员,在胞内特异性介导多种调控蛋白的泛素化降解来调节细胞的生物学进程,如减数分裂向有丝分裂期的转变等。Cu13-SPOP的晶体结构解析将对其功能特异性的研究有重要意义。此复合物经过长期的优化已在多种条件下得到晶体,但衍射力还有待提高,期待通过进一步的工作能有所突破。   第三部分工作内容为痢疾杆菌谷氨酸/天冬氨酸结合蛋白(sfEBP)的底物结合性质研究。通过对DEBP的变复性操作成功制备了此蛋白的Ligand free样品,并测定了DEBP的底物结合性质,证实了DEBP极强的底物结合特异性。
其他文献
转录后基因沉默(Post-transcriptional gene silencing,PTGS)是生物体中普遍存在的一种RNA转录后降解的生物学现象,在基因表达调控和防卫过程中具有重要作用。经典研究认为此现
学位
随着现代雷达技术不断发展,真空管雷达发射机阴极脉冲调制器的设计面临许多新的要求。本文首先介绍阴极脉冲调制技术应用,分析阴极脉冲调制器波形失真对发射机射频性能的影响,分
空间辐射环境的存在会对器件造成一定的损伤,因此实时监测器件吸收的辐射剂量显得非常重要。PMOS辐照传感器的性能指标是辐照灵敏度、辐照稳定性、准确性等,并且与多种因素有
摘要:语文人格教育要求对学生进行品德修养上的教育,利用语文学科“人文性”和“工具性”的特点,放大本学科的优势。在日常学习生活中,进行爱的教育,重视自身道德修养,用自己的人格影响学生的一生,培养学生形成健康健全的人格,这是一项长期的、为学生终身发展而进行的教育。  关键词:语文人格教育;学生;品德;修养;健全  中图分类号:G633.3 文献标识码:A 文章编号:1992-7711(2016)04-
天然免疫系统(innate immune system)是机体抵御病原微生物入侵的第一道防线。病毒侵染宿主后,机体通过模式识别受体(pattern recognition receptors)识别病毒的病原相关分子
IP是TCP/IP协议族的网络层协议。IPv4(Internet Protocol Version 4)是最广泛应用的网络层协议,但在使用过程中也逐渐暴露出不少缺陷。IPv6(Internet Protocol Version 6)是I
LTE (Long Term Evolution,长期演进)是3GPP组织的下一代移动通信网络的标准化演进计划。LTE系统将网络结构简化,与空中接口相关的功能都被集中在eNodeB (Enhanced-NodeB,增
菌株选育工作在工业生物技术的发展中占有重要的一席,传统的菌株选育技术近年也得到了飞速发展,但是菌株选育的效率不高,无法满足快速发展的生物技术产业化的需求。近年来,高通量
本刊讯据消息,海南省农业厅近日下发紧急通知,要求为保证海南省农产品质量安全,从即日起全省禁止在蔬菜上使用三唑磷和毒死蜱。据了解,三唑磷和毒死蜱两种农药产品易导致蔬菜
在哺乳动物植入前胚胎发育过程中,胚胎细胞对称破缺何时发生及其在细胞命运决定中的作用一直是悬而未决的问题。  通过对人和小鼠植入前胚胎单细胞转录组测序的结果分析,本文