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1、生长分化因子5基因启动子表达载体的构建 目的:构建含人生长分化因子5(GDF5)基因启动子表达载体(pGL3-GDF5)。 方法:扩增人GDF5基因启动子序列，克隆至pGL3-Basic表达载体并转化入大肠杆菌DH10b，双酶切鉴定并测序。 结果:PCR扩增后的产物在约854 bp处出现明显的特异性条带，酶切鉴定结果与理论预测值一致，测序未出现碱基突变。 结论:成功构建了含GDF5基因启动子的表达载体。 2、雌雄激素干预对骨髓间充质细胞生长分化因子5水平的影响 目的:从细胞水平探讨雌、雄激素对骨髓间充质细胞GDF5基因表达的影响。 方法:体外培养骨髓间充质细胞ATDC5，将构建好的含GDF5基因启动子的表达载体，转染至ATDC5细胞，分别给予不同浓度的雌激素、雄激素刺激后检测荧光强度。 结果:与对照组相比，雌激素刺激后GDF5的mRNA表达无统计学意义(p＞0.05)，雄激素对GDF5的表达有明显增强的作用并且呈剂量递增效应。 结论:雄激素能够增强GDF5基因的表达，而雌激素对GDF5基因的表达无明显差异。