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杆状病毒是多种有害昆虫的病原体，利用杆状病毒作为生物农药控制农作物和森林害虫已经得到了人们的高度重视。但是杆状病毒杀虫剂存在的杀虫速度慢，对高龄幼虫活性低，杀虫谱窄等方面的缺陷，限制了它的进一步推广应用。为了克服这些缺点，已经有多种遗传改良措施被应用于新型杆状病毒杀虫剂的研制。马尾松松毛虫质型多角体病毒(Dendrolimus puntatus cytoplasmic polyhedrosisvirus，DpCPV)具有较宽的宿主范围，能够感染10个科的35种昆虫，但其杀虫速度较慢。本研究构建了含DpCPV外层衣壳蛋白的棉铃虫核多角体病毒(Helicoverpa armigera nucleopolyhedrovirus, HearNPV)，尝试利用CPV外层衣壳蛋白与昆虫中肠上皮细胞的结合特性，增加重组病毒的感染性以及进入非敏感宿主中肠上皮细胞的机率。
本实验室前期研究结果表明，马尾松松毛虫质型多角体病毒的基因组S4节段编码该病毒的VP3蛋白，其N端400aa蛋白的抗体可以明显的抑制该病毒对敏感细胞和敏感宿主的感染性。本文先将DpCPV基因组的S4节段的5端1500 bp的片段与苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒(AcMNPV) ODV-e66基因的5端69 bp的ODV囊膜定位序列融合，并利用杆状病毒的Bac-to-Bac系统，将该融合片段插入到HearNPV基因组中，同时回复多角体基因和插入报告基因egfp，该重组HearNPV命名为HaBac-e66vp3N。同时构建不含囊膜定位序列的重组病毒HaBac-vp3N以及只插入多角体基因和报告基因的重组病毒HaBac-ph。通过PCR验证、荧光显微镜观察和western-blot验证了三种重组病毒均构建成功。重组病毒包涵体分别饲喂敏感宿主棉铃虫幼虫和非敏感宿主甜菜夜蛾幼虫，感染后约24 h发现棉铃虫幼虫中肠上皮组织中有EGFP的表达，但在HearNPV非敏感宿主甜菜夜蛾中肠上皮组织直到48 h没有发现绿色荧光。将重组病毒喂食3龄初棉铃虫幼虫，两次生测结果均表明，HaBac-e66vp3N、HaBac-vp3N和HaBac-ph三种重组病毒之间的毒力无显著性差异。本研究的结果表明，CPV的外层衣壳蛋白并没有增加重组核多角体病毒的感染性，也没有介导核多角体病毒进入非敏感宿主中肠上皮细胞。