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目的：胃癌是临床最常见的恶性肿瘤之一，在就诊时多数胃癌病例己属中晚期，目前以外科手术为主的治疗仍是治疗的主流方向，但最终很多病人会死于局部复发和远处转移，术后5年生存率仅为30-40％。胃癌淋巴结转移和转移程度是影响胃癌预后的最重要原因之一，所以在胃部手术前对淋巴结的转移做出确定的判断，对提高手术治疗的质量、提高病人的生存率以及病人的生活质量、进行个体化的治疗在临床治疗中具有重要的意义。恶性肿瘤侵袭、转移的一个极其重要的步骤是细胞外基质(extracellularmatrix，ECM)的降解，这一过程中基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases，MMPs)家族和组织抑制因子(tissue inhibitor ofmetalloproteinases，TIMPs)家族在ECM降解过程中发挥了重要作用。MMPs几乎能全部进行ECM降解和血管基底膜降解，从而促进了肿瘤的侵袭和转移，MMP-9在胃癌中的研究已有大量报道，但它在淋巴结转移中的研究较少；TIMPs是MMPs的天然抑制剂，通过抑制MMPs可以发挥其抑制肿瘤侵袭和转移的作用，但目前有关TIMPs在胃癌及淋巴结中TIMP表达的意义的研究仍然较少，且其研究结论也不一致。本研究通过免疫组化方法(S-P法)、聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白免疫印迹(Western-blot)三种方法对胃癌组织及区域淋巴结组织中MMP-9、TIMP-1的表达水平进行检测，分析其表达在二者中的关系，以期为胃癌侵袭转移规律的研究提供依据，并为胃癌综合治疗提供理论依据。 方法：选取在河北省人民医院2008年3月至2009年5月进行手术切除的胃癌患者60例，其中男性43例，女性17例，年龄25～74岁，中位年龄为61岁。采相应的区域淋巴结标本60例、正常胃粘膜30例(距肿瘤边缘>5.0cm)。所有胃癌临床记录均按全国胃癌诊治规范登记各项指标。切片均为病理科专科医师复核确认。采用免疫组化(S-P)法、RT-PCR、Western-blot三种方法检测正常胃粘膜、区域淋巴结和胃癌组织中MMP-9、TIMP-1的表达，并进一步分析MMP-9、TIMP-1的表达与胃癌患者性别、年龄、肿瘤部位、直径、Borrmann分型、肿瘤分化程度、侵润深度、淋巴结转移情况、临床分期等肿瘤临床病理特征的关系。所有数据均用SPSS11.5统计软件进行统计学分析，以P<0.05为差异有统计学意义。 结果： 1胃癌组织与正常胃粘膜组织MMP-9、TIMP-1的表达情况比较S-P结果显示MMP-9在胃癌组织中的阳性率(68.3％)较正常胃粘膜的阳性率(26.7％)明显升高(P<0.05)；胃癌组织中的TIMP-1的阳性表达率(35.7％)较正常胃粘膜的阳性表达率(66.7％)明显降低(P<0.05)。 RT-PCR结果显示MMP-9 mRNA在胃癌组织中的表达水平(0.82±0.15)明显高于正常胃粘膜组织(0.31±0.05)，两者比较有显著性差异(P<0.05)；TIMP-1 mRNA在胃癌组织中的表达水平(0.19±0.04)明显低于正常胃粘膜组织(0.73±0.12)(P<0.05)，两者比较有显著性差异(P<0.05)。 Western-bolt结果显示MMP-9蛋白在胃癌组织中的表达(0.76±0.15)明显高于正常胃粘膜组织(0.24±0.05)，两者比较有显著性差异(P<0.05);TIMP-1蛋白在胃癌组织中的表达(0.21±0.06)明显低于正常胃粘膜组织(0.69±0.13)，两者比较有显著性差异(P<0.05)，与RT-PCR结果相符。 2胃癌区域淋巴结中MMP-9、TIMP-1的表达情况S-P法显示胃癌区域淋巴结转移阳性组中MMP-9的表达率(73.5％)明显高于转移淋巴结阴性组MMP-9的表达率(7.69％)，两者比较有显著性差异(P<0.05)；胃癌区域淋巴结组织中转移淋巴结组TIMP-1的阳性表达率(20.6％)明显低于无转移淋巴结组的阳性表达率(53.9％)，两者比较有显著性差异(P<0.05)。 胃癌区域淋巴结组织中，MMP-9表达阳性组淋巴结转移率(92.6％)明显高于MMP-9表达阴性组淋巴结转移率(27.3％)，两者比较有显著性差异(P<0.05)；胃癌区域淋巴结组织中，TIMP-1表达阳性组淋巴结转移率(33.3％)明显低于TIMP-1表达阴性组淋巴结转移率(69.2％)，两者比较有显著性差异(P<0.05)。 RT-PCR结果显示MMP-9 mRNA在胃癌区域淋巴结组织有转移淋巴结组中的表达水平(0.86±0.21)明显高于无转移淋巴结组(0.13±0.04)，两者比较有显著性差异(P<0.05)；TIMP-1 mRNA在胃癌区域淋巴结组织有转移淋巴结组中的表达水平(0.19±0.06)明显低于无转移淋巴结组(0.71±0.18)，两者比较有显著性差异(P<0.05)。 Western-bolt结果显示MMP-9蛋白在胃癌区域淋巴结组织有转移淋巴结组中的表达水平(0.79±0.16)明显高于无转移淋巴结组(0.14±0.05)，两者比较有显著性差异(P<0.05)；TIMP-1蛋白在胃癌区域淋巴结组织有转移淋巴结组中的表达水平(0.20±0.06)明显低于无转移淋巴结组(0.63±0.11)，两者比较有显著性差异(P<0.05)，与RT-PCR结果一致。 3胃癌组织中MMP-9、TIMP-1表达与其临床生物学行为之间的关系S-P法、RT-PCR、Western-bolt结果均显示胃癌组织中MMP9和TIMP-1表达与患者性别、年龄、肿瘤部位、大小和Borrmann分型均无关(P>0.05)，但与分化程度、浸润深度、淋巴结转移、临床分期密切相关。 S-P法显示MMP-9表达低分化组阳性表达率(81.2％)较高中分化组(50％)明显升高(P<0.05)；T3+T4组阳性表达率(71.7％)较T1+T2组(42.9％)明显增高(P<0.05)；有淋巴结转移组阳性表达率(85.3％)较无淋巴结转移组(46.1％)明显增高(P<0.05)；Ⅲ-Ⅳ组阳性表达率(76.9％)较Ⅰ-Ⅱ组(52.4％)明显增高(P<0.05)。低分化组TIMP-1阳性表达率(21.9％)较高中分化组(50％)明显降低(P<0.05)；T3+T4组阳性表达率(30.2％)较T1+T2组(71.4％)明显降低(P<0.05)；有淋巴结转移组阳性表达率(26.5％)较无淋巴结转移组(65.4％)明显降低(P<0.05)；临床分期中，Ⅲ-Ⅳ组阳性表达率(20.5％)较Ⅰ-Ⅱ组(61.9％)明显降低(P<0.05)。RT-PCR结果显示低分化组MMP-9mRNA表达水平(0.87±0.12)较高中分化组(0.76±0.17)明显升高(P<0.05)；T3+T4组表达水平(0.84±0.14)较T1+T2组(0.69±0.16)明显增高(P<0.05)；有淋巴结转移组表达水平(0.85±0.14)较无淋巴结转移组(0.77±0.16)明显增高(P<0.05)；Ⅲ-Ⅳ组表达水平(0.85±0.15)较Ⅰ-Ⅱ组(0.75±0.14)明显增高(P<0.05)。低分化组TIMP-1 mRNA表达水平(0.16±0.07)较高中分化组(0.20±0.05)明显降低(P<0.05)；T3+T4组表达水平(0.13±0.08)较T1+T2组(0.19±0.06)明显降低(P<0.05)；有淋巴结转移组表达水平(0.15±0.07)较无淋巴结转移组(0.21±0.05)明显降低(P<0.05)；Ⅲ-Ⅳ组表达水平(0.16±0.05)较Ⅰ-Ⅱ组(0.20±0.08)明显降低(P<0.05)。 Western-bolt结果显示胃癌组织中MMP-9蛋白低分化组表达水平(0.85±0.17)较高中分化组(0.70±0.13)明显升高(P<0.05)；T3+T4组表达水平(0.79±0.15)较T1+T2组(0.64±0.14)明显增高(P<0.05)；有淋巴结转移组表达水平(0.81±0.16)较无淋巴结转移组(0.68±0.14)明显增高(P<0.05)；Ⅲ-Ⅳ组表达水平(0.85±0.17)较Ⅰ-Ⅱ组(0.71±0.13)明显增高(P<0.05)。TIMP-1低分化组表达水平(0.18±0.06)较高中分化组(0.22±0.04)明显降低(P<0.05)；T3+T4组表达水平(0.14±0.07)较T1+T2组(0.21±0.08)明显降低(P<0.05)；有淋巴结转移组表达水平(0.17±0.07)较无淋巴结转移组(0.23±0.06)明显降低(P<0.05)；Ⅲ-Ⅳ组表达水平(0.18±0.05)较Ⅰ-Ⅱ组(0.22±0.06)明显降低(P<0.05)。与S-P、RT-PCR结果一致。 4胃癌组织中MMP-9、TIMP-1表达呈明显负相关(r=-0.629，P<0.05)。 结论： 1胃癌组织中MMP-9、TIMP-1表达呈负相关，其平衡失调在胃癌的侵袭转移中发挥着重要的作用。 2有胃癌转移的区域淋巴结组织中MMP-9表达增高、TIMP-1表达降低，与胃癌的淋巴结转移有关。