【摘 要】
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本论文研究包括两部分,一是重组鸡IL-18多克隆IgG的研制,二是鸡IL-18基因重组真核表达质粒pChIL-18直接注射作鸡柔嫩艾美耳球虫疫苗分子佐剂的研究。 一.本研究以本室构
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本论文研究包括两部分,一是重组鸡IL-18多克隆IgG的研制,二是鸡IL-18基因重组真核表达质粒pChIL-18直接注射作鸡柔嫩艾美耳球虫疫苗分子佐剂的研究。
一.本研究以本室构建的mChIL-18基因重组原核表达质粒PBVmChIL-18转化菌,诱导表达、变性、复性、纯化的mChIL-18蛋白,免疫新西兰白兔,制备高免血清,再粗提多克隆抗体IgG,经WesternBlot及ELISA检测表明获得了特异、高效价(10-6)的ChIL-18多克隆抗体IgG。应用它以WesternBlot方法可特异检测本实验室构建的禽巴氏杆菌外膜蛋白H基因(ompH)与ChIL-18基因联合重组的真核表达载体cDNA3.1/ompH/ChIL-18(简称PompH+ChIL-18)转染Cos7细胞瞬时表达的ChIL-18。
二.本实验扩展试验pChIL-18直接注射鸡体抗球虫感染作用及提高鸡球虫疫苗免疫的分子佐剂效果和机理。实验采用pChIL-18单独注射易感3d龄雏鸡,pChIL-18与鸡柔嫩艾美耳球虫早熟株疫苗,按试验设计的免疫程序联合注射pChIL-18免疫,免疫后检测血液T细胞转化、球虫特异性抗体水平及消长、攻虫保护试验等。
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